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兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒價格

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更新時間:2015-11-12 11:36:37瀏覽次數:83次

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產品簡介

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒更具有競爭力,嵐派生物Elisa試劑盒質量保證,專售科研試劑,價格更優惠,期待您的來電合作!

詳細介紹

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA 檢測試劑盒
本試劑僅供研究使用 
試驗原理:
TPA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知TPA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TPA和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中TPA的活性濃度呈比例關系。
 
試劑盒內容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存)    96孔配置    48孔配置    配制
96/48份酶標板    1塊板(96T)    半塊板(48T)    即用型
塑料膜板蓋    1塊    半塊    即用型
標準品:400ng/ml    1瓶(0.6ml)    1瓶(0.3ml)    按說明書進行稀稀
空白對照    1瓶(1.0ml)    1瓶(0.5ml)    即用型
標準品稀釋緩沖液    1瓶(5ml)    1瓶(2.5ml)    即用型
*標記的抗TPA抗體    1瓶(6ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
親和鏈酶素-HRP    1瓶(10ml)    1瓶(5.0ml)    即用型
洗滌緩沖液    1瓶(20ml)    1瓶(10ml)    按說明書進行稀釋
底物A    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
底物B    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
終止液    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
 
自備材料
1.  蒸餾水。
2.  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.  振蕩器及磁力攪拌器等。
 
安全性
1.  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.  實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
 
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA 檢測試劑盒操作注意事項
1.  試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.  實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.  不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4.  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.  洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.  底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.  加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.  按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
 
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA 檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、  血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、  細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、  保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
試劑的準備
1.  標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
400ng/ml    (6號標準品)    原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
200ng/ml    (5號標準品)    100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
100ng/ml    (4號標準品)    100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50ng/ml    (3號標準品)    100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
25ng/ml    (2號標準品)    100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
12.5ng/ml    (1號標準品)    100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0ng/ml    (空白對照)    原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
 
2.  洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
 
兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA 檢測試劑盒操作步驟
1.  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.  根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.  加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.  甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.  甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.  取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.  在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
4.局限性:6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。
 
 
結果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
 
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TPA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TPA含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
 
3、檢測值范圍:0-400ng/ml
 
4、敏感度: 1.0ng/ml


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