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信帆生物
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用于檢測液體樣本的甘油含量檢測試劑盒等您來了解!

時間:2020/9/27閱讀:1552
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用于檢測液體樣本的甘油含量檢測試劑盒等您來了解!

信帆生物供應液體樣本甘油檢測試劑盒,產品適用于測定血液、細胞培養基、體液、酒類飲料中的甘油濃度,產品質量穩定,現貨充足!

描述:甘油是甘油三酯的水解產物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食 物中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪細胞中的甘油三酯。與游離脂肪酸一樣,甘 油含量是甘油三酯水解反應的可靠檢測指標,但檢測更方便。本試劑盒采用甘油磷酸氧化酶法 和經典 GPO-Trinder 酶學反應相結合的方法,通過比色法測定液體樣本中的甘油含量。經過優 化后,操作步驟更加簡單,檢測線性范圍在 10-1200µmol/L,可靠性和重復性俱佳,適合生物 醫學、食品實驗室檢測。

參考文

1.Trinder, P. (1969). Ann. Clin. Biochem. 6: 24 – 27.

2.Barham D and Trinder P. (1972). Analyst 97: 142 – 145

ATP 3-氧 化氫;在過氧化物酶作用下生色底物轉化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。

適用范圍:測定血液、細胞培養基、體液、酒類飲料中的甘油濃度。

R1 試劑 20 ml R2 試劑 5 ml

4 mmol/L 甘油標準品 1 ml

4 ºC,儲存6 個月。

所需設備:酶標儀、生化分析儀或 721722 型可見光分光光度計。佳工作波長 550nm,如 無此波長建議優先選用 570nm、次選 530490nm

操作步

一、樣本處

  1. 酒類、飲品、清澈液體樣本:可直接進行測定,如超過線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后 再測定。

2培養養基4ºC,12,000g 5min,取上清進行測定。

3凝血4ºC2,000g 5min 漿4ºC 2h 2000g 10min,漿/70ºC 10 肪酶12,000g 離心 10min ,取上清測定或-20ºC 保存。

工作溶液配制: 4:1 比例,取 4 ml 試劑 R1 1 ml 試劑 R2 混合,立即使用或 4ºC 保存

<1 天,變色棄去。

標準品稀釋:用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將 4 mM 甘油標準品倍比稀 釋為 100050025012562.531.2515.6257.8125 µmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意設置 0 濃度對照反應管

四、 甘油濃度測定:

1參見下表進行加樣。為使反應時間盡量一致,減小實驗誤差,可先加入標準品、待測樣品,然后再加入工作溶液。(注意:當甘油濃度較低時,可將待測樣品與工作溶液按照 100µl:100µl體積混合,然后再進行測定,但是如果樣品體積超過100µl時將會稀釋工作液中酶的濃度,使反應靈敏度下降。如果待測樣品濃度超過線性范圍,可進行適當稀釋,然后根據稀釋倍數來計算樣品中甘油濃度。)

237ºC 或 25ºC 反應 15 分鐘。反應平衡后顏色在 60 分鐘定。 3先用蒸餾水+工作液的空白管調零,然后測定各管 OD 值。

4繪制標準曲線并計算甘油濃度。

附 Excel 作圖步驟:各標準管 OD 值為 y 軸,標準品濃度為 x 軸。(1)鼠標左鍵圈住數據,點擊做圖向導,選擇-散點圖-,點擊-完成-。(2)鼠標右鍵點圖上的某一點,點擊-添加趨勢線-,點擊-選項-,點擊-顯示公式-和-R2 值-。 

表一:

酶標微板測定的加樣比例(檢測范圍  10-1200µmol/L

(可對樣品和工作液比例進行微量調整)

 

低濃度甘油樣品測

高濃度甘油樣品測定

 

空白管

標準品

樣本管

空白管

標準品

樣本管

蒸餾水µl

50

 

 

5

 

 

標準品µl

 

50

 

 

5

 

樣品µl

 

 

50

 

 

5

工作液µl

150

150

150

195

195

195

 

 

表二:

1 ml 比色杯測定的加樣比例(檢測范圍 10-1200µmol/L

 

低濃度甘油樣品測

高濃度甘油樣品測定

 

空白管

標準品

樣本管

空白管

標準品

樣本管

蒸餾水µl

200

 

 

50

 

 

標準品µl

 

200

 

 

50

 

樣品µl

 

 

200

 

 

50

工作液µl

600

600

600

750

750

750

 

說明:

1維生素  C>0.18g/L、血紅蛋白>2g/L、膽紅素>0.25g/L、二硫蘇糖醇、巰基乙醇、高濃度  EDTA干擾測試。

2、正常血清甘油濃度為20-130µmol/L,細胞培養時須用不含酚紅的無色無血清培養基,如果 培養基中含有酚紅,可以選擇含有酚紅的無細胞培養基作為對照上海

 

用于檢測液體樣本的甘油含量檢測試劑盒等您來了解!

 

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