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信帆生物
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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研究如何選擇樣品稀釋液

時(shí)間:2020/10/15閱讀:1128
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研究如何選擇樣品稀釋液

1.嗜滲菌和嗜鹽菌的稀釋液

20%的無(wú)菌蔗糖溶液適用于嗜滲菌計(jì)數(shù),研究嗜鹽菌(如食鹽樣品)時(shí),可使用15%無(wú)菌的氯化鈉溶液作為稀釋液。

2.厭氧微生物的稀釋液

對(duì)食品中的厭氧微生物進(jìn)行定性或定量檢測(cè)時(shí),必須使氧化作用減至zui低,此時(shí)應(yīng)使用梭狀芽孢桿菌培養(yǎng)基或具有相似成分的培養(yǎng)基作為稀釋液。制備樣品懸液時(shí)應(yīng)盡量避免氧氣進(jìn)人其中。這時(shí)zui常用的Colworh均質(zhì)器,而不用頂部攪拌均質(zhì)器或底部攬拌的均質(zhì)器,后兩者只有當(dāng)均質(zhì)容器中充滿脫氧氮?dú)鈺r(shí)才可使用。

檢測(cè)對(duì)氧氣極其敏感的厭氧菌時(shí),除使用適當(dāng)?shù)南♂屢和?,還要具備一些特殊的樣品防護(hù)措施,如使用Hungate技術(shù)或厭氧工作站等。

3.普通稀釋液
0.1%pH6.8~7.0的無(wú)菌蛋白胨水,磷酸鹽緩沖溶液或25%Ringer氏溶液都是較好的稀釋液;0.1%的蛋白胨水要比磷酸鹽緩沖液或25%Ringer氏溶液保護(hù)效果更好,因此是zui常用的稀釋液。

在zui低稀釋度時(shí),樣品可能會(huì)改變稀釋液的性質(zhì)。特別是當(dāng)樣品中水不溶物占的比例很大時(shí),樣品在稀釋液中的溶解度會(huì)受到影響。食品樣品的溶解度到底有多大,是不是稀釋液的pH或水分活度(AW)也會(huì)受到影響。如果有疑問(wèn),應(yīng)該測(cè)定第-一個(gè)稀釋度的pH,水分活度可用水分活度儀或類似的儀器測(cè)定(通過(guò)測(cè)定樣品中可溶性固型物可以得到水分活度的變化>。為了防止pH變化,可在稀釋液中加入磷酸鹽緩沖液。例如Dixont和Wilson(1960)成功地用pH7.0-7.2 0.5mol/1磷酸鹽緩沖液稀釋了含園藝肥料的過(guò)磷酸鈣,從中分離得到沙門(mén)氏菌。而以前一直認(rèn)為這樣的肥料不含沙門(mén)氏菌。

高溶解度的干燥樣品(如奶粉、嬰兒食品)在zui低稀釋度時(shí)水分活度很低,應(yīng)該選擇蒸餾水作為稀釋液; 一般說(shuō)來(lái),zui合適的稀釋液應(yīng)該通過(guò)一系列的試驗(yàn)得到,所選擇的稀釋液應(yīng)該具有zui的復(fù)蘇率。
樣品稀釋液的制備過(guò)程應(yīng)在15~30min內(nèi)完成。

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