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信帆生物
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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信帆生物為大家圖解RT-PCR的實(shí)驗(yàn)流程

時(shí)間:2015-12-7閱讀:1770
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RT-PCR定義:
是指對(duì)組織或細(xì)胞的總RNA進(jìn)行抽提,把RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA,然后設(shè)計(jì)目的基因引物進(jìn)行PCR,瓊脂糖電泳并數(shù)碼拍照,分析電泳條帶灰度值,判斷目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的相對(duì)量的變化。 

RT-PCR流程簡(jiǎn)介

一、抽提RNA: 
1、防止RNA酶污染 
180℃的高溫下干烤6hr以上; 
0.1% DEPC水浸泡或用氯仿沖洗; 
去污劑洗滌,雙蒸水沖洗;
溶液皆用0.1% DEPC水配置,試劑應(yīng)為新開封或RNA; 
操作人員戴手套; 
器械。 
 

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