日韩欧美一区二区三区免费观看_精品国产欧美一区二区_波多野结衣乱码中文字幕_最新无码国产在线视频2021

信帆生物
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

13764793648

信帆生物代做:mRNA實(shí)驗(yàn),PCR實(shí)驗(yàn)代測(cè)

時(shí)間:2016-1-11閱讀:1233
分享:

信帆生物代做mRNA實(shí)驗(yàn),咨詢!mRNA實(shí)驗(yàn)PCR代測(cè)服務(wù)操作流程!

1. 設(shè)計(jì)并合成Realtime PCR引物
2. 引物溶解后使用Promega的TaqDNA聚合酶進(jìn)行含SG(SYBR Green)的PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
3. RNA抽提
    a. 若實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品,取適量(50-100mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml的RNA抽提試劑Trizol(Invitrogen),勻漿后抽提RNA。
    b. 若實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品,每份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,*吸去培養(yǎng)液后加1ml的RNA抽提試劑Trizol(Invitrogen),裂解后抽提RNA。
4. RNA質(zhì)量檢測(cè)
    a. 紫外吸收測(cè)定法測(cè)定RNA在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,以計(jì)算其濃度并評(píng)估RNA純度。
    b. 使用甲醛電泳試劑(ambion)進(jìn)行變性瓊脂糖凝膠電泳,檢測(cè)RNA純度及完整性。
5. cDNA合成
     按照逆轉(zhuǎn)錄酶(Invitrogen或Promega)5. 使用說(shuō)明將樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。
6. 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(可選)
    進(jìn)行相對(duì)定量,需要先將樣品的目的基因以及管家基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增, 其產(chǎn)物進(jìn)行梯度稀釋用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
7. 實(shí)時(shí)定量PCR
     標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品和待測(cè)樣品分別加入到含SG的RealTimePCR反應(yīng)液中(其中TaqBead熱啟動(dòng)聚合酶來(lái)自Promega公司),進(jìn)行RealTime PCR擴(kuò)增和檢測(cè)
8. 數(shù)據(jù)分析
    檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線分析,以對(duì)待測(cè)樣品的目的基因進(jìn)行定量。相對(duì)定量實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)一步用樣品的目的基因測(cè)得值除以管家基因測(cè)得值以校正誤差,所得結(jié)果代表某樣品的目的基因相對(duì)含量。9. 提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告:包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果及相關(guān)圖表。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 武夷山市| 华蓥市| 七台河市| 丹江口市| 渭源县| 阜南县| 鄂温| 岚皋县| 武山县| 新乐市| 桓仁| 资阳市| 基隆市| 沙田区| 高要市| 前郭尔| 射洪县| 安阳县| 泽普县| 泸定县| 加查县| 彭州市| 阿荣旗| 江油市| 紫阳县| 云南省| 商南县| 古田县| 久治县| 内黄县| 大理市| 张北县| 马鞍山市| 报价| 巫山县| 永康市| 偃师市| 长泰县| 班玛县| 柳州市| 望谟县|