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凝血酶是一種絲氨酸蛋白酶，也是血液凝血級聯反應中的主要效應蛋白酶，顯現出促凝和抗凝的特性。

凝血酶是由在凝血酶原復合物中的非活性凝血酶原在Xa因子（FXa）因子的作用下通過蛋白裂解的方式產生【生理作用】當循環凝血因子在暴露的血管外組織與組織因子相接觸時，凝血酶會在組織上聚集。

凝血酶通過激活血小板，催化纖維蛋白原轉化為纖維蛋白，在血栓性疾病的引發和傳播上有著核心作用。

取纖維蛋白原約30mg，精密稱定，用0.9％ 氯化鈉溶液1.5ml溶解，加凝血酶0.1ml(約3單位)，快速搖勻,室溫放置約1小時至*凝固，取出凝固物，用水洗至洗出液加硝酸銀試液不產生渾濁，在105℃干燥3小時,稱取重量,計算纖維蛋白原中含凝固物的含量(％)。

然后用0.9％氯化鈉溶液制成含0.2％凝固物的纖維蛋白原溶液,用0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液或0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液調節pH值至7.0～7.4，再用0.9％氯化鈉溶液稀釋成含0.1％凝固物的溶液，備用。

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標準曲線的制備
取凝血酶標準品，用0.9％氯化鈉溶液分別制成每1ml中含5.0單位、6.4單位、8.0單位、10.0單位的標準品溶液。

另取內徑1cm、長10cm的試管4支,各精密加入纖維蛋白原溶液0.9ml，置37℃±0.5℃水浴中保溫5分鐘，再分別精密量取上述4種濃度的標準品溶液各0.1ml，迅速加入上述各試管中，立即計時、搖勻，置37℃±0.5℃水浴中，觀察纖維蛋白的初凝時間，每種濃度測5次,求平均值（5次測定之zui大值與zui小值的差不得超過平均值的10％,否則重測）。

標準品溶液的濃度應控制凝結時間在14～60秒為宜。在雙對數坐標紙上，以每管中標準品實際效價（單位）為橫坐標，凝結時間（秒） 為縱坐標，繪制標準曲線。

測定法
取本品3瓶，分別精密稱定其內容物的重量,每瓶按標示量分別加0.9％氯化鈉溶液制成與標準曲線濃度相當的溶液，精密吸取0.1ml，按標準曲線的制備方法平行測定5次，求出凝結時間的平均值（誤差要求同標準曲線），在標準曲線上或用直線回歸方程求得效價（單位），按下式計算：

1圖冊
式中Ｕ為0.1ml供試品在標準曲線上讀得的實際效價(單位)；
Ｖ為每瓶供試品溶解后的體積，ml；
10為0.1ml換算成1.0ml的數值；
Ｗ為每瓶供試品的重量，mg。
并計算出每瓶相當于標示量的百分數。

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