NAD激酶（NADK）-測試盒

(貨號:A117-1-1NAD Kinase50T/24 樣)

測定原理:

NADK 催化 NAD*磷酸化，生成 NADP+，NADP可被 6-磷酸萄脫酶還原為 NADPH:通過在 340nm 下測定 NADPH 的增加速率可反映出 NADK 活性的大小。

自備實驗用品及儀器：

水浴鍋、離心機(jī)、可見分光光度計、1 ml石英比色皿、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 50mlx1 瓶，4C 保存:

試劑一: 溶劑 25mlx1 瓶，4 保存:

試劑二:溶劑 50mlx1 支，4C 保存:

試劑三:粉劑x1 瓶，-20C 保存:

試劑四:粉劑x1 瓶，-20C 保存。

樣品前處理:

詳見試劑盒內(nèi)說明書關(guān)于樣本處理的說明。測定組織、細(xì)菌和細(xì)胞時需要測定蛋白濃度。可用本所的A045-2總蛋定量測試盒(考馬斯亮法或者A045-3A045-4總蛋定量測試盒(BCA法)進(jìn)行蛋白濃度的測定。

測定步驟：

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調(diào)零；

2、將溶劑一與溶劑二在 37攝氏度 (哺乳動物)或 25攝氏度(其他物種)水浴 15min 以上；

3、工作液I的配制:在試劑三中加入 12ml 溶劑一，充分混勻待用；現(xiàn)配現(xiàn)用；

工作液 II 的配制:在試劑四中加入 45ml 溶劑二，充分混勻待用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

4、操作表：

NAD激酶（NADK）-測試盒