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miRNA QPCR檢測

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌GEMIG

廠商性質生產商

所  在  地上海

更新時間:2025-02-03 10:02:46瀏覽次數:749次

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miRNA QPCR檢測
服務介紹:熒光定量PCR是通過熒光染料(SYBR Green)或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結合相應的軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。可以用于檢測miRNA的基因表達水平。

miRNA QPCR檢測

服務介紹:

熒光定量PCR是通過熒光染料(SYBR Green)或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結合相應的軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。可以用于檢測miRNA的基因表達水平。

名稱

規格

miRNA QPCR檢測

/基因/樣

 

 實驗流程:

取材-RNA提取逆轉錄成cDNA-miRNA引物設計合成-QPCR擴增-數據分析-發報告

miRNA采取特異性逆轉錄,默認采用莖環法,如需使用加尾法請提前告知。

送樣運輸要求:

1. 樣品處理

a) 動物組織:常規組織100mg,脂肪組織,結締組織,纖維化組織適當增加。將組織剪切成合適大小后(建議組織塊長寬高均不大于0.5 cm),然后迅速完-全浸泡于5~10倍體積的RNAsolidTM試劑中。(注意:已浸入RNAsolidTM試劑中的組織經平衡一段時間后,可從溶液中取出,切成更小的組織塊,再重新放回RNAsolidTM試劑中;有些比較弱的液體滲透性組織如骨頭等,不適合用RNAsolidTM試劑進行RNA保護。)

b) 植物組織:新鮮的葉、果肉、種子等最少100 mg。將嫩葉,嫩莖組織切成合適的大小(建議長寬高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完-全浸泡于5~10倍體積的RNAsolidTM試劑中。(注意:某些植物組織天生具有的屏障,如葉子表面的蠟層可阻礙RNAsolidTM試劑的滲透,對于此類組織,通常需破壞這些屏障層以允許溶液的浸透。)

c) 細胞等樣本:收集不少于10^6個細胞沉淀(用PBS清洗1-2次),干冰運輸。

d) 酵母、細菌等樣本:離心棄上清,收集一定量的菌體沉淀,干冰運輸。

e)全血:最少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管,干冰運輸。

f)血清或血漿:最少1 mL,干冰運輸。

g) RNA樣品: OD260/280為1.8-2.0,濃度≥100 ng/μL,體積≥20μL,干冰運輸。

h)cDNA(必須能檢測miRNA基因):cDNA原液≥20 μL,干冰運輸。 

2. 樣品保存及運輸

加入有RNAsolidTM試劑的樣本可在37℃保存1~2天,2天以后部分組織中的RNA會開始降解。室溫(25℃)穩定保存1周,不會有明顯的RNA降解發生。大部分樣品置于RNAsolidTM試劑中,4℃條件下可穩定保存1個月,不會有明顯的RNA降解發生。長期存放可先將保存在RNAsolidTM試劑中的樣本4℃浸透過夜,然后將RNAsolidTM試劑吸出棄去,再將樣本放入-20℃或-80℃長期穩定保存3~5年。

 


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