日韩欧美一区二区三区免费观看_精品国产欧美一区二区_波多野结衣乱码中文字幕_最新无码国产在线视频2021

信帆生物
中級會員 | 第11年

13764793648

當前位置:信帆生物>>生物試劑>> 細胞核蛋白和胞漿蛋白制備試劑盒

細胞核蛋白和胞漿蛋白制備試劑盒

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

  • 廠商性質

    生產商

  • 所在地

    上海

更新時間:2025-02-10 08:27:23瀏覽次數:810次

聯系我時,請告知來自 環保在線
同類優質產品更多>
級別 其他
細胞核蛋白和胞漿蛋白制備試劑盒
本試劑盒用于從哺乳動物組織和培養細胞中提取核蛋白或胞質蛋白,提取制備過程簡便。制備的核蛋白和胞漿蛋白能保持天然活性,并且純度較高。提取的蛋白特別適于轉錄因子活性分析、凝膠阻滯實驗(gel shift assay, EMSA)、免疫共沉淀、酶活性測定,也適于 Western Blot 實驗。

所有產品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等

細胞核蛋白和胞漿蛋白制備試劑盒

操作步驟:

1. 裂解(1) 培養細胞,PBS洗滌細胞兩次,根據細胞計數,或者估計離心后的細胞體積PCV。每1 ×106個細胞加入50~100ul的CEB-A,刮下細胞轉移至預冷的1.5ml離心管;或者每體積PCV細胞加入5倍PCV體積的CEB-A (即10~20 ml PCV的細胞加50~100ul的CEB-A),劇烈振蕩重懸。

裂解: (2) 組織樣本,精確稱重后剪成小塊,PBS洗滌。通常每10 mg動物組織相當于1×106個細胞,需加入50~100ulCEB-A,參照上表按比例加入。在冰上使用玻璃勻漿器勻漿組織,通常需要20~40次上下抽動勻漿,棄去筋膜組織。切記勿用高速電動勻漿器或超聲破碎組織避免破壞細胞器結構。

2.  裂解產物轉移至預冷的1.5ml離心管,劇烈振蕩30秒,冰浴10~15min,期間每5分鐘振蕩15秒。

3. 可選步驟:根據步驟2裂解物體積,加入1/20體積的CEB-B,振蕩10秒,冰浴1min (加入CEB-B可去除部分核膜蛋白,適于制備高純度的核蛋白用于EMSA凝膠阻滯實驗等,但可使胞漿蛋白出現很少量的膜蛋白污染。若制備高純度胞漿蛋白可跳過此步驟。若制備核蛋白僅用于普通的Western Blot目的,則無須高純度核蛋白,也可省略此步驟。

4.  胞漿蛋白組分的制備:將步驟2或步驟3的上清,12000g 4 oC離心5min,勿觸動沉淀,將上清轉移到新管,此即胞漿蛋白組分,可立即使用或−20~−70ºC保存。

5. 胞核粗提組分的制備:取第步驟4的原離心管,12000g 4 oC瞬時離心,盡量吸除上清,保留沉淀。加入100μl CEB-A和5μl  CEB-B,振蕩10秒,重懸沉淀,冰浴1min,1000g 5min,棄上清。再次加入100μl CEB-A和5 μl CEB-B重懸沉淀冰浴1min,1000g 5min,盡棄上清,保留沉淀。

6.   胞核蛋白的制備:加50~100μl預冷NEB重懸步驟5的離心沉淀,劇烈振蕩15秒,冰上30min,期間每10 min振蕩15秒。12000g 5min,上清液含核蛋白成分,其中含有25%的甘油;可立即使用或−20~−70ºC保存。

 

細胞核蛋白和胞漿蛋白制備試劑盒

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 翼城县| 平乡县| 栾川县| 台南县| 郎溪县| 麻栗坡县| 辉县市| 陆丰市| 乐都县| 延长县| 黄龙县| 夏邑县| 安义县| 盐池县| 修文县| 盐源县| 北辰区| 贡嘎县| 武义县| 济南市| 马公市| 台安县| 高台县| 永平县| 苏州市| 襄城县| 阳东县| 阿克陶县| 甘泉县| 弥渡县| 岑溪市| 涟源市| 葵青区| 大同市| 五家渠市| 噶尔县| 确山县| 泾阳县| 双城市| 青州市| 长垣县|