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高脂樣本甘油三酯（TG）酶法測定試劑盒

原理：（1）脂肪酶分解血清中的甘油三酯為甘油；（2）甘油激酶將甘油磷酸化為3-磷酸甘油；（3）3-磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化產生過氧化氫；在過氧化物酶作用下生色底物轉化為苯醌亞胺，其光密度值與甘油濃度成正比。

適用范圍：適用于動物實體組織、培養細胞樣品中甘油三酯含量的測定。

操作步驟：

一 組織細胞裂解：（在裂解前，組織或者細胞用PBS洗滌兩次以去除甘油）

1.原代脂肪細胞：2000g，5分鐘離心收集細胞。建議每100 µl壓積（Packed Cell Volume）脂肪細胞加入1ml裂解液，震蕩裂解，而后室溫靜

置10分鐘。

2.分化脂肪細胞或非脂肪細胞：可先用胰酶消化、離心收集細胞而后進行裂解，也可直接在培養皿內進行裂解。通常情況下，(6孔板單孔約為2x10⁶ 個細胞，75cm²瓶約為1x10⁶ 個細胞)可按比例每1x10⁶ 個細胞加入0.1ml裂解液，混勻后室溫靜置10分鐘。

3.動物組織：離心管精確稱重，加入組織塊后再稱重，二者相減(即減量稱重法)計算組織重量(約50mg)。強烈建議按比例每1mg組織加20µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。強烈建議裂解液用量在1ml左右，保證有效的勻漿裂解與脂質提取。用電動高速勻漿器或手動玻璃勻漿器破碎組織。（不超聲方法，因其不能*和均勻破碎。應根據預實驗調整初始的組織細胞加入量），勻漿后靜置10分鐘。

高脂樣本甘油三酯（TG）酶法測定試劑盒