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高脂樣本總膽固醇(TC)酶法測定試劑盒
操作步驟;
一. 組織細胞裂解:
裂解前,組織或細胞用PBS洗滌2次去除殘存血液或培養基血清,以免影響膽固醇測定。
1)培養細胞裂解:
消化、離心收集細胞或直接在培養皿內裂解。通常6孔板單孔約2x106個細胞,75cm2瓶約1x107細胞。按比例每1x106個細胞加0.1ml裂解液,震蕩混勻,靜置10分鐘。
2) 動物組織裂解:
切記要預先將新鮮組織剪切稱重后再進行保存。組織凍存后再進行解凍、剪切、稱重可能會產生嚴重的測量誤差。離心管精確稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計算組織重量(約100mg)。強烈建議按比例每1mg組織加10µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質含量變異而產生的誤差。(注意;裂解液用量在1ml或更多可保證有效的裂解與脂質提?。S秒妱痈咚賱驖{器或手動玻璃勻漿器破碎組織。(不超聲方法,因其不能*和均勻破碎。應根據預實驗調整初始的組織細胞加入量),而后靜置10分鐘。
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