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組織細(xì)胞谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒

GR可以將GSSG還原為GSH，GSH可以和DTNB反應(yīng)生成黃色的TNB和GSSG。在GSSG和DTNB相對(duì)過(guò)量的條件下，利用該反應(yīng)可以通過(guò)測(cè)定生成TNB的吸光度（A_412nm）定量檢測(cè)GR活性。本試劑盒以GSH以TNB標(biāo)準(zhǔn)品和反應(yīng)時(shí)間定量GR酶活性。檢測(cè)線(xiàn)性范圍為4.7-150mU/ml，靈敏度≤4.7mU/ml。

適用范圍：本試劑盒能夠檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、實(shí)體動(dòng)物組織等多種其它生物樣本中的GR活性。

利用TNB標(biāo)準(zhǔn)品的量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并獲得橫縱坐標(biāo)之間的函數(shù)關(guān)系式，然后利用該標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和各樣品的吸光度值計(jì)算樣品中一定時(shí)間段(注：計(jì)算酶活性的時(shí)間段采用5-15分鐘時(shí)間段，這樣可以避免樣品本身的顏色及樣品中較高濃度GSH和NADPH對(duì)反應(yīng)的干擾)內(nèi)產(chǎn)生的TNB量，從而換算為谷胱甘肽還原酶活力（注意精確計(jì)時(shí)）。對(duì)于細(xì)胞和組織樣品，可以根據(jù)樣品中蛋白濃度測(cè)定，計(jì)算每毫克蛋白中谷胱甘肽還原酶活力。由于有多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的測(cè)定，可以選擇時(shí)間線(xiàn)性良好的時(shí)間段計(jì)算谷胱甘肽還原酶活力。

谷胱甘肽還原酶定義：在25℃，PH 7.6條件下，每分鐘還原1.0μmol GSSG為GSH的谷胱甘肽還原酶為1 U，1 U=1000 mU。

      計(jì)算公式：酶活力(mU)=TNB生成量（nmol）/2/反應(yīng)時(shí)間(min)。

組織細(xì)胞谷胱甘肽還原酶檢測(cè)試劑盒