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血清血漿外泌體(Exosome)提取試劑
操作步驟
1. 每1體積的樣品,加入0.2體積的外泌體純化試劑。例如1ml樣品加0.2ml外泌體純化試劑,5ml樣品加1ml外泌體純化試劑,充分混勻。
2. 4 ºC孵育12小時,無需搖動。注意:血清血漿富含蛋白,孵育可縮短至1個小時。
3. 1500× g離心15分鐘收集外泌體沉淀,棄上清。常溫或4 ºC離心不影響結果。
4. 1500× g再次離心5分鐘,小心吸除殘余液體,勿觸動外泌體沉淀。
5. 加100µl PBS重懸外泌體沉淀。若初始樣品及外泌體沉淀多可多加PBS重懸。后續若進行Western blot可直接加50-100 µl RIPA Lysis Buffer #C1053裂解外泌體。如提取RNA可在PBS重懸外泌體后,采用RNAtrip LS 液體樣品RNA提取試劑R1020提取外泌體RNA。
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