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小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa（GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61）ELISA試劑盒

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更新時間：2015-03-09 16:08:14瀏覽次數(shù)：246次

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卡邁舒（上海）生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

卡邁舒（上海）生物科技有限公司專業(yè)研發(fā)銷售各種屬科研ELISA試劑盒,并提供無償代檢測服務(wù),是國內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專業(yè)供應(yīng)商,小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa（GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61）ELISA試劑盒質(zhì)量保證,*,發(fā)貨及時,運輸嚴(yán)格,周到的服務(wù)團(tuán)隊竭誠為您的科研之路保駕護(hù)航！

詳細(xì)介紹

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒中內(nèi)容(96孔)

1．重組人VEGF凍干標(biāo)準(zhǔn)品，10ng/管，總2管。

2．預(yù)包被抗人VEGF抗體的96孔板。

3．樣品稀釋液，30ml。

4． *標(biāo)記抗人VEGF，120μl，效價1：100。

5．抗體稀釋液，12ml。

6．親和素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC），120μl，效價1：100。

7． ABC稀釋液，12ml。

8． TMB顯色液，10ml。

9． TMB終止液，10ml。

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1．標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2．自動洗板機(jī)。

3．系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器。

4．干凈的試管和Eppendof管。

5．使用中性PBS或TBS作為洗滌液。0.01M TBS配法為：1000ml H2O中加Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸450μl或濃鹽酸700μl左右調(diào)節(jié)pH值(7.2-7.6)。 0.01 M PBS（pH7.2-7.6）配法：1000ml蒸餾水中加氯化鈉8.5g, Na2HPO4·12H2O 3.5g, NaH2PO4·2H2O 0.25g。

洗板方法

手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將*的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板：如果有自動洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒操作程序

所有試劑用前需在室溫平衡。試劑或樣品稀釋時，切不可忘記混勻。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果估計樣品VEGF濃度＞2000pg/ml時，應(yīng)在試管中將樣品用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目，并增加1孔作為TMB空白顯色孔。總數(shù)=樣品數(shù)+9；做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。

2．將1000pg/ml ，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.3pg/ml，15.6pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、體液、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清，每孔先加50μι樣品稀釋液，再加50μι樣品。

3．酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)120分鐘。

4．反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體（將自動洗板機(jī)的洗滌次數(shù)設(shè)為零再開始即可）；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。不洗。

5．將準(zhǔn)備好的*抗人VEGF抗體工作液按每孔0.1ml依次加入（TMB空白顯色孔除外）。37℃反應(yīng)60分鐘。

6． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次，每次浸泡1分鐘左右。吸去或甩去多余液體。

7．將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入（TMB空白顯色孔除外）。37℃反應(yīng)30分鐘。

8． 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次，每次浸泡1-2分鐘左右。吸去或甩去多余液體。

9．按每孔0.1ml依次加入TMB顯色液，37℃避光反應(yīng)20-25分鐘（此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔差別不明顯）。

10．按每孔0.1ml依次加入TMB終止液，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。

11．用酶標(biāo)儀在450nm測定O.D.值，將TMB空白顯色孔設(shè)為對照。

12．所有的標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后，在坐標(biāo)紙上畫出曲線，以吸光值作為縱坐標(biāo)，以濃度作為橫坐標(biāo)。

13．根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算(下載)。應(yīng)記住由于樣品稀釋了1倍，其實際濃度應(yīng)該×2。

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒操作程序總結(jié)：

1．加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)120分鐘。不洗。

2．加*標(biāo)記抗體，37℃反應(yīng)60分鐘。0.01M TBS洗滌3次。

3．加ABC，37℃反應(yīng)30分鐘。0.01M TBS洗滌5次。

4． TMB37℃反應(yīng)20-25分鐘。

5．加入TMB終止液，讀數(shù)。

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丙二酸鈉培養(yǎng)基	10g	生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌丙二酸鹽利用試驗（GB，SN標(biāo)準(zhǔn)）
Malonate Broth
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂	10g	生化培養(yǎng)基，用于細(xì)菌衛(wèi)矛醇發(fā)酵試驗（SN標(biāo)準(zhǔn)）
Dulcitol Semisolid Agar
GN增菌液	250g	主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng)，亦可用于沙門氏菌的增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
Gram Negative Enrichment Broth
木糖賴氨酸去氧膽酸鹽瓊脂（XLD）	250g	選擇性培養(yǎng)基，用于分離志賀氏菌屬，也可用于分離沙門氏菌屬
Xylose Lysine Desoxycholate Medium
志賀氏菌增菌肉湯	250g	用于志賀氏菌增菌培養(yǎng)
Shigella Broth
WS瓊脂	250g	用于沙門氏菌的選擇性分離（GB標(biāo)準(zhǔn)）
WS Salmonella Agar