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技術文章

一氧化氮(NO)測定試劑盒(硝酸還原酶法)說明書

閱讀:1099發布時間:2015-5-12

一氧化氮(NO)測定試劑盒(硝酸還原酶法)    Nitric Oxide (NO) assay kit (Nitrate reductase method)    50管/48樣、25管/24樣    盒
NO化學性質活潑,體內代謝轉化為硝酸鹽(NO3ˉ)和亞硝酸鹽(NO2ˉ),血清(NO3ˉ)與(NO2ˉ)濃度之和(NO3ˉ┼NO2ˉ)才能準確代表體內(NO)水平。血清(NO3ˉ┼NO2ˉ)含量測定,國內有的單位采用金屬鎘還原法,但該法操作繁瑣(血清需除蛋白),反應不易控制(金屬鎘可將NO2ˉ進一步還原),一氧化氮(NO)測定試劑盒(硝酸還原酶法)且不能*將NO3ˉ還原為 NO2ˉ,準確性差。
本測試法為一種靈敏、簡便、快速、穩定、易推廣的方法。
NO化學性質活潑,在體內代謝很快轉為NO2ˉ和NO3ˉ,而NO2ˉ又進一步轉化為NO3ˉ,本法利用硝酸還原酶特異性將NO3ˉ還原為NO2ˉ,通過顯色深淺測定其濃度的高低。
產品優點如下:
1、快速簡便:全程約2小時,可測100例以上樣本。
2、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
3、再現性好:變異系數CV=1.7%。
4、回收試驗: X =103.3%。
5、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
6、測試面廣:可測動物血液、組織、細胞、各種培養細胞、腦脊液、胸水、腹水、尿液、胃液、植物組織以及各種水產效果均佳。
所需儀器及自備試劑:
1、分光光度計/酶標儀/*(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、漩渦混勻器
4、臺式離心機
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
操作流程:
1、按步驟加入樣本和R1、R2混合試劑,37℃水浴60分鐘
2、加入R3、R4,抽提室溫靜置40分鐘,3500~4000轉/分,離心10分鐘
3、取上清0.5 ml,加入顯色劑,靜置10分鐘,550nm波長,0.5cm光徑,比色
批間CV   批內CV   回收率   zui底檢出線       檢測范圍
5.19     2        103      1.0μmol/L       0-800μmol/L
一氧化氮(NO)測定試劑盒(硝酸還原酶法)本試劑盒保存期:6個月,貯存溫度:2~8℃,特別提醒R1、R2以及標準品需放在-20℃以下冷凍保存。


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