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紅細胞裂解液說明書

閱讀:478發布時間:2015-06-08

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豬外周血淋巴細胞分離液
說明:適用于從血液中分離所需細胞。
紅細胞裂解液說明書密度:1.1100±0.0001g/ml
儲存條件:15-25℃避光保存,啟封后置4℃保存。


紅細胞裂解液
保存:2-8℃保存,保質期2年。常溫運輸。
產品簡介:
本產品是利用細胞內外存在鹽離子濃度差而導致細胞膜脹裂的原理來分解無核紅細胞的。
本產品經無菌處理,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。
紅細胞裂解液說明書使用說明: 
1.1倍體積的新鮮全血,加入3倍體積的紅細胞裂解液。如1ml新鮮全血加入3ml紅細胞裂解液,輕輕渦旋或顛倒混勻。
2.冰上放置15分鐘,其間輕輕渦旋混勻兩次,紅細胞裂解后,溶液應該是清亮透明的。
3.收集細胞:4℃,450×g離心10分鐘以沉淀白細胞,小心吸棄上清液。
4.向白細胞沉淀中加入兩倍體積的紅細胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細胞。如起始血液為1ml,則加入2ml的紅細胞裂解液。
5.4℃,450×g離心10分鐘沉淀白細胞,小心并*吸去上清液。
6.重懸細胞,用于后續實驗;如提取RNA,于此步開始使用DEPC水配制的溶液進行操作。(組織細胞處理:新鮮組織經*或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液,離心棄去上清液,其余同上。)
注意事項:
樣品要求新鮮,建議血液等現采現做;在第二次裂解的時候,一定要將細胞充分懸起混勻,只要細胞分散充分,一般情況下都會裂解比較*。個別情況:如果樣品中含有有核紅細胞,則裂解不*。例如鳥或禽類的紅細胞。


*(阿氏液)
阿氏液
阿氏液。
配制方法
阿氏液配方如下:
葡萄糖 2.05克
檸檬酸鈉 0.8克
檸檬酸 0.055克
氯化鈉 0.42克
紅細胞裂解液說明書加蒸餾水至100毫升,加熱溶解后將pH值調到6.1,經過69千帕,15分鐘的高壓滅菌,放置在4℃的環境內,保存備用。
用途
阿氏液主要用于保存紅細胞,在4℃的環境下,紅細胞可以保存2周而不改變活性和特性。因此阿氏液用于采血、保存和運送紅細胞進行化驗。


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