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上海酶聯生物研究所

ELISA試劑盒怎么做好優化

時間:2017-2-15閱讀:189
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ELISA試劑盒質量確保是一個雜亂的進程,很多重要的環節都會影響檢查質量。每一職業商品都有好有壞,由于生產廠家繁復,讓消費者在選擇這一塊有了很大的困惑。

ELISA試劑盒加樣的優化:
在這一進程中,通常狀況下有三次加樣,它們分別是加標本,加酶物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質部分濃縮,散布不均,應充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上激烈振蕩。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝結、縮短后即可獲得。也可在板孔中參加稀釋液,再在其參加血清標本,然后在微型震動器上震動1分鐘以確保混和。通常說來,在5天內測定的血清標本可放置于4℃,超過一星期測定的需低溫冰存。

ELISA試劑盒包被條件的優化:
1.包被液的選擇:通常常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,假如包被的抗原在堿性條件下不穩定的話,也可以運用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
2.包被濃度的選擇:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質變化,通常蛋白質的包被濃度為1-5ug/ml,要明確對于特定包被抗原的zui適包被濃度需求經過試驗來斷定。
3.包被溫度的選擇:通常是4-8度條件下放置一個黑夜或許37度保溫2小時,我們激烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的堅持。
4.包被抗原的選擇:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。小分子抗原比方多肽以及一些小分子有機化合物,由于分子量太小,通常難于直接吸附在酶標板上,通常都先使其與無關蛋白質,比方BSA等偶聯,偶聯物吸附于固相載體上。

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