ELISA（酶聯(lián)免疫試驗(yàn)）以其靈敏度較高、特異性好的特點(diǎn)已廣泛用于科研試驗(yàn)及臨床，越來(lái)越多科研單位挑選用ELISA試驗(yàn)辦法完結(jié)研究課題。的試劑、好的儀器和正確的操作是確保ELISA試劑盒檢測(cè)成果牢靠的必要條件，但樣本的搜集及保存操作不當(dāng)也會(huì)影響ELISA試驗(yàn)成果。樣本的搜集跟保存聽(tīng)上去形似很簡(jiǎn)單，但不乏有許多科研工作者由于樣本的搜集跟保存沒(méi)做好而影響試驗(yàn)成果。
 

下面針對(duì)樣本搜集及保存酶聯(lián)生物提幾點(diǎn)主張：
1.嚴(yán)峻溶血，以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性，催化底物顯色構(gòu)成假陽(yáng)性；
2.混有紅細(xì)胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈；如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反應(yīng)：
3.標(biāo)本凝結(jié)不全，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開(kāi)端凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心別離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中能夠構(gòu)成肉眼可見(jiàn)的
纖維蛋白塊，易構(gòu)成假陽(yáng)性成果；
4.采血試管洗刷不*、重復(fù)運(yùn)用易穿插污染：塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。
 

血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)，嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深。超越一周測(cè)定的需－20℃保存。凍住血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，弄清后再檢測(cè)。重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測(cè)，宜少數(shù)分裝冰存；運(yùn)用一次性玻璃試管或真空管*；并運(yùn)用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值，可能與高濃度肝素具有強(qiáng)壯的負(fù)電荷能吸附酶符號(hào)物不易洗脫有關(guān)；EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA體系中辣根過(guò)氧化物酶活性；血液標(biāo)本采集后必須使其充沛凝結(jié)后再別離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶別離膠的*或于*中參加恰當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>