關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方法，直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合，但都只適用于曲線的一部分，有的適用于前半段，有的適用于后半段，有的適用于中心一段，而Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的適用性。當(dāng)然，假如用于定量，仍是在中心一段較 好。這些方法雖然沒(méi)有一種方法能夠通用，但也都能夠用。關(guān)鍵在于你的標(biāo)準(zhǔn)曲線做到了S形的哪一部分，你想檢測(cè)的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃 度部分能夠用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部分能夠用直線方程，中心部分可用對(duì)數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。

做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問(wèn)題需求留心
1、樣品的濃度等方針是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的，所以首要要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后邊的實(shí)驗(yàn)效果無(wú)從談起。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度規(guī)劃要有一個(gè)比較大的跨度，而且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度規(guī)劃之內(nèi)，包括上限和下限。而關(guān)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中心斜度zui陡段，即曲線簡(jiǎn)直成直線的規(guī)劃內(nèi)。
3、選用倍比稀釋法制造標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)呈現(xiàn)較大的違背。
4、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，應(yīng)按濃度遞加次序進(jìn)行，以削減高濃度對(duì)低濃度的影響，前進(jìn)準(zhǔn)確性。
5、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn)，但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
6、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所改變，但一般來(lái)說(shuō)，相數(shù)R至少要大于0.98，關(guān)于有些實(shí)驗(yàn)，至少要0.99甚至是0.999.

其實(shí)，在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi)，Logistic應(yīng)該都能擬合得較為志向。但并不是說(shuō)它就是的。實(shí)際上不僅是ELISA，其它許多生物學(xué)反應(yīng)都是S形曲線，也都能夠用Logistic曲線擬合。但建模型是一回事，而用它來(lái)定量是另一回事。假如用來(lái)定量，S形曲線的中心段（較陡處）是比較好的，而兩端的平 坦部分計(jì)算誤差會(huì)大，有時(shí)甚至?xí)艽蟆?/p>