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上海酶聯生物研究所

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小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)

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更新時間:2017-07-26 13:32:38瀏覽次數:169次

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小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)
細胞介紹
該細胞是源自C57BL/6的細胞毒性的T淋巴細胞,其生長依賴IL-2。
細胞特性
1)來源:T細胞
2)形態:懸浮生長
3)含量:>lxl06個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有優質胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入* 使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。


小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號 21875-091),80%;補充 2mM的L-*,ImM的丙酮酸鈉;另外添加250U/mlrmlL-2(recombinantmouseInterleukin 2),添加ConA的T-STIM (BDPharmingen,貨號354115),10%;優質胎牛血清,10%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱 濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢 查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。


小鼠T淋巴細胞 (CTLL-2)
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養液后吹句,將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培 養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細 胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應 將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細 胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管 中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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