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人神經母細胞瘤細胞(SK-N-SH)

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更新時間:2017-07-25 17:23:25瀏覽次數:416次

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人神經母細胞瘤細胞(SK-N-SH)
細胞介紹:
SK-N-SH細胞系由j.L.Bieder建系,它與SK-N-MC所不同的是倍增時間較長且多巴胺-(3-羥基酶水平較高。SK-N-SH在細胞介導的細胞毒性試驗中用作靶細胞系。
細胞特性
1)來源:腦神經母細胞瘤,轉移部位骨髓
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。


人神經母細胞瘤細胞(SK-N-SH)
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備MEM培養基(MEM,GIBCO,貨號41500034,添加NaHC031.5g八,丙酮酸鈉O.llg八),90%;優質胎牛血清,10%。
2. 培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。


人神經母細胞瘤細胞(SK-N-SH)
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養液后吹勻。
將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約lml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加1〇%DMSO后進行凍存。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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