串聯親和純化屬于親和純化的一種（比較了幾種常用的親和純化技術的優缺點和常見應用領域）。zui常用的親和純化技術是免疫沉淀法，通過抗體-抗原的親和作用，“捕捉”到相互作用的蛋白。但是普通的免疫沉淀法由于抗體存在交叉反應，而可能會導致很多的假陽性結果，不利于分析復合體的功能組分。串聯親和純化方法借助于特殊設計的標簽，通過兩步純化得到更純的復合體組分，能夠避免過多的“噪音”干擾。

    一般而言，一個用于蛋白純化和驗證蛋白相互作用的理想標簽應該具有以下特征：①使結合基質對低濃度目的蛋白的有高親和力；②使目的蛋白比非特異蛋白對親和物質有更高的結合特異性；③使目的蛋白能而且特異性的洗脫；④使洗脫條件適合以保持蛋白相互作用和蛋白復合體結構。很明顯，這些條件在一定程度上自相矛盾，但是在1999年，通過對FLAG、His、Strep、*蛋白A的兩個IgG結合結構域（ProtA）、鈣調蛋白結合肽（CBP）、角質素結合結構域（CBD）等篩選，Rigaut等發現ProtA和CBP是zui符合上述條件的有效標簽，它們能夠有效地回收目的蛋白，分別大約為80%和50%（Rigautetal. 1999）。其中CBP標簽可以在溫和條件下有效篩選目的蛋白，并從親和柱上釋放出來，而ProtA卻只有在低pH變性條件下才能從基質結合的IgG上釋放出來。根據這些標簽的特性，研究人員開發了一種新的蛋白純化串連技術，命名為TAP———抗體TandemAfinityPurification（串聯親和純化）。他們在ProtA和CBP之間插入一個特異的 TEV蛋白酶識別位點，構建成一個融合標簽，命名為TAP標簽，可以分別通過ProtA和CBP作兩步串聯親和純化。純化一個TAP標簽融合的目的蛋白（X）一般包括以下4步：

1.的蛋白所在復合體通過標簽上的ProtA結合到IgG珠子。

2.滌去掉大部分非特異蛋白之后，TEV酶切后將結合的目的蛋白復合體從IgG珠子洗脫下來。

3.在鈣離子存在的條件下，通過暴露出的CBP結構域，洗脫組分中目的蛋白復合體結合到鈣調蛋白包被的珠子上。

4.洗滌之后，加入 EGTA螯合鈣離子，使目的蛋白復合體洗脫下來。

    這種串聯親和純化方法尤其適用于蛋白復合體純化和鑒定相互作用蛋白（Rigautetal.19）。使TAP融合蛋白在生理條件下處于自然表達水平，可以在事先不知道復合體組成、活性和功能的情況下，利用相對少量的細胞快速純化出蛋白復合體，然后結合質譜技術，可以鑒定出與目的蛋白相互作用的未知蛋白。而且，純化出的蛋白復合體組分保留體內活性，可以用于體外生物學功能實驗。串聯親和純化技術和其他蛋白純化或蛋白-蛋白相互作用技術一樣有很多相似之處，但仍有其自身的優勢：純化條件接近生理環境，可以獲得活性組分；背景污染低，比單獨用ProtA或者CBP作一步親和純化能得到更純的蛋白復合體組分（Coxetal.2002；Rigautetal.1900）。抗體