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上海研生生化試劑有限公司

微核試驗

時間:2015-12-28閱讀:499
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    微核與染色體損傷有關,是染色體或染色單體的無著絲點斷片或紡錘絲受損傷而丟失的整個染色體,在細胞分裂后期在細胞質中,末期之后,單獨形成一個或幾個規則的次核,包含在子細胞的胞質內,因其比主核小,故稱微核。

    微核試驗優點是操作簡便,容易觀察,具有分裂能力的培養細胞均可用于顯示微核。選擇細胞較大,細胞質豐富,細胞質完整的雙核淋巴細胞,微核游離于細胞質中與主核*分開,著色與主核一致或略淺,大小為主核的1/3以下。一般需要計數2000個細胞。

一、實驗材料

1.受試材料人外周血。

2.RPMll640培養,含20%小牛血清。

3.KCl低滲液 配制75mmol/L KCl水溶液。

4.固定液(甲醇:冰醋酸一3:1)。

5.Glemsa染液。細胞

6.松胞素(Cyt—B)6μg/ml。

二、實驗方法

1.常規外周血37℃培養96小時,不加秋水仙素。

2.將培養物移人離心管中,1000r/min,離心8min,棄上清液。

3.每管加入75mmol/L KCl溶液3ml,37℃低滲處理3min。

4.每管加入甲醇冰醋酸(3:1)固定液l ml,輕輕打勻預固定。

5.1200r/min,離心8min,棄上清液。

6.每管加上述固定液3 ml,置室溫固定:3min。

7.1000 r/min,離心8min,棄上清液加少許固定液混勻滴片。

8.10%Giernsa染色10min。

三、結果分析

微核計數的標準:

1.微核著色深淺與主核相同。

3.位于胞漿內。細胞

4.與主核不連接(以區別主核的突起)。

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