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上海研生生化試劑有限公司

培養(yǎng)基的制備與消毒

時間:2016-4-14閱讀:151
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 一、實驗?zāi)康?nbsp;
 了解培養(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法。 

 二、實驗原理 
  培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無機鹽、生長因素和水。根據(jù)微生物的種類和實驗?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。 

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用zui廣泛和zui普通的細菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細胞生長繁殖所需要的zui基本的營養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長繁殖之用。 

干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達到殺死微生物的效果。 

三、試劑與器材 
 1.器材 
  試管、三角瓶、燒杯、量筒、玻璃棒、培養(yǎng)基、分裝器、天平、牛角匙、高壓蒸汽滅菌鍋、pH度紙、棉花、牛皮紙、記號筆、麻繩、紗布、吸管、培養(yǎng)皿、電烘箱、注射器、微孔濾膜過濾器、鑷子等。 

 2.試劑 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂 

四、實驗內(nèi)容 
 1.稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查 
 2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物 
 3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查 
 4.過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌 

五、關(guān)鍵步驟及注意事項 
 1.要嚴格按配方配制。 
 2.調(diào)pH不要過頭。 
 3.干熱滅菌要注意物品不要堆放過緊,注意溫度的時間控制,70oC以下放物、取物。 
 4.高壓滅菌要注意物品不要過多,加熱后排除冷空氣,到時降壓回零取物。 
 5.過濾除菌要注意各部件滅菌,壓濾時,壓力要適當,不可太猛太快,濾膜要注意清洗保存。

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