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ELISA試劑盒的檢測原理

時間:2017-3-6閱讀:758
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ELISA試劑盒的檢測原理
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成究竟的黃色。
用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),經(jīng)過規(guī)范曲線核算樣品中牛甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)濃度。 
本試劑盒運用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)水平。
用純化的牛甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次參與甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2),再與HRP符號的甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)抗體聯(lián)絡(luò),構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗刷后加底物TMB顯色。
色彩的深淺和樣品中的甘露糖聯(lián)絡(luò)蛋白C(MBL2)呈正有關(guān)。
濃洗刷液或許會有結(jié)晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響作用。
各步加樣均應(yīng)運用加樣器,并常常校正其準(zhǔn)確性,以避免實驗過失。
ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保留。
一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運用排槍加樣。
請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復(fù)孔。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算底物請避光保留。
嚴(yán)厲按照說明書的操作進(jìn)行,實驗作用斷定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
時請畢竟乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
全部樣品,洗刷液和各種廢棄物都應(yīng)按感染物處理。
封板膜只限一次性運用,以避免穿插污染。
ELISA試劑盒不一樣批號組分不得混用。

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