ELSIA操作步驟復雜，影響反應因素較多，PAI Elisa kit特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PAI Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區域。

PAI Elisa kit技術操作要點：

1. 標本的采取和保存。
2. 試劑的準備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標比色儀。
8. 結果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。PAI Elisa kit蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯結多發生在Fc段上，抗體結合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PAI Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預包被，其后通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被的另一優點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質，如聚賴氨酸、*等作預包被，也可提高核酸的結合力。也可用親和素*系統作間接包被，PAI Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。

脂類物質無法與固相載體結合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發后，讓脂質自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PAI Elisa kit相關產品*：xyG555Ra    大鼠脂肪酸轉運蛋白1(FATP1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Fatty Acid Transport Protein 1 (FATP1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyG799Ra    大鼠精脒/精胺N1-乙酰基轉移酶1(SAT1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Spermidine/Spermine N1-AHZtyltransferaHZ 1 (SAT1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyH593Ra    大鼠C-Myc結合蛋白(MYCBP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for C-Myc Binding Protein (MYCBP)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyJ026Ra    大鼠*酶(GLS)ELISA試劑盒    ELISA Kit for GlutaminaHZ (GLS)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyJ620Ra    大鼠細胞骨架活性調節蛋白(ARC)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Activity Regulated Cytoskeleton Associated Protein (ARC)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
HEA821Ra    大鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法，高敏)    High HZnsitive ELISA Kit for C Reactive Protein (CRP)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC262Ra    大鼠緊密連接蛋白1(TJP1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Tight Junction Protein 1 (TJP1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB428Ra    大鼠腺苷酸環化酶10(ADCY10)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Adenylate CyclaHZ 10, Soluble (ADCY10)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC939Ra    大鼠蛋白酶激活受體1(PAR1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for ProteaHZ Activated ReHZptor 1 (PAR1)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC603Ra    大鼠血管舒張劑激活磷蛋白(VASP)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Vasodilator Stimulated Phosphoprotein (VASP)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyG527Ra    大鼠雙*/**蛋白激酶(DSTYK)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Dual HZrine/Threonine And Tyrosine Protein KinaHZ (DSTYK)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB222Ra    大鼠突觸核蛋白α(SNCα)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyG377Ra    大鼠鈣離子轉運ATP酶B2(ATP2B2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for ATPaHZ, Ca++ Transporting, Plasma Membrane 2 (ATP2B2)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA433Ra    大鼠蛋白激酶Cδ(PKCδ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Protein KinaHZ C Delta (PKCd)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA506Ra    大鼠D-二聚體(D2D)ELISA試劑盒    ELISA Kit for D-Dimer (D2D)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC133Ra    大鼠ⅩⅨ型膠原(COL19)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Collagen Type XIX (COL19)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA127Ra    大鼠蛋白酶激活受體4(PAR4)ELISA試劑盒    ELISA Kit for ProteaHZ Activated ReHZptor 4 (PAR4)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB726Ra    大鼠CD163分子(CD163)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA864Ra    大鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)     檢測范圍： 10.358-1000pg/ml