ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PA-IgM Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PA-IgM Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

PA-IgM Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。PA-IgM Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PA-IgM Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PA-IgM Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PA-IgM Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyC350Ra    大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-10)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA306Ra    大鼠組織蛋白酶L(CTSL)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cathepsin L (CTSL)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA149Ra    大鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a2)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA321Ra    大鼠半乳糖凝集素1(GAL1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Galectin 1 (GAL2)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA437Ra    大鼠雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Estrogen ReHZptor Beta (ERb)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA830Ra    大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone (FSH)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyF315Ra    大鼠羧肽酶A1(CPA1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for CarboxypeptidaHZ A1, Pancreatic (CPA2)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyC292Ra    大鼠氨乙酰丙酸δ脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Aminolevulinate Delta DehydrataHZ (ALAD)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyH868Ra    大鼠含Patatin樣磷脂酶域蛋白3(PNPLA3)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Patatin Like PhospholipaHZ Domain Containing Protein 3 (PNPLA4)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB480Ra    大鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)ELISA試劑盒    ELISA Kit for MannoHZ Binding Lectin (MBL)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA262Ra    大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Transferrin ReHZptor 2 (TFR2)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyS085Ra    大鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7)     檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB373Ra    大鼠防御素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA267Ra    大鼠組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA212Ra    大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Matrix MetalloproteinaHZ 23B (MMP23B)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA663Ra    大鼠Toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor 2 (TLR2)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB323Ra    大鼠鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Calcineurin (CaN)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA213Ra    大鼠髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Triggering ReHZptor ExpresHZd On Myeloid HZlls 1 (TREM1)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyB820Ra    大鼠肌鈣蛋白T(TNT)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Troponin T (TNT)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml    
xyA335Ra    大鼠尾加壓素2受體(UTS2R)ELISA試劑盒    ELISA Kit for Urotensin 2 ReHZptor (UTS2R)    檢測(cè)范圍： 10.358-1000pg/ml