ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，PAF Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，PAF Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

PAF Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。PAF Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，PAF Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，PAF Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

PAF Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyA380Mu    小鼠血管活性腸肽(VIP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA902Mu    小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant (ACP5)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA310Mu    小鼠載脂蛋白H(APOH)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein H (APOH)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA722Mu    小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Stromal Cell Derived Factor 4 (SDF4)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA794Mu    小鼠周期素依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A (CDKN2A)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA224Mu    小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA606Mu    小鼠腦紅蛋白(NGB)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Neuroglobin (NGB)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA581Mu    小鼠水通道蛋白3(AQP3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 3, Gill Blood Group (AQP3)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA582Mu    小鼠水通道蛋白4(AQP4)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aquaporin 4 (AQP4)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA394Mu    小鼠組織因子通道抑制因子(TFPI)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor (TFPI)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA584Mu    小鼠血紅素氧合酶1(HO1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA154Mu    小鼠糖抗原125(CA125)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Carbohydrate Antigen 125 (CA125)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA151Mu    小鼠*3(KLK3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA153Mu    小鼠甲胎蛋白(αFP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA539Mu    小鼠髓鞘堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA585Mu    小鼠細(xì)胞周期素D1(CCND1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Cyclin D1 (CCND1)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA864Mu    小鼠淀粉樣蛋白β1-40(Aβ1-40)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA872Mu    小鼠熱休克蛋白40(HSP40)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock Protein 40 (HSP40)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA867Mu    小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml    
xyA868Mu    小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶(NOS3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3)    檢測(cè)范圍： 11.254-1000pg/ml