ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，mIgA Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，mIgA Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

mIgA Elisa kit技術(shù)操作要點：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。mIgA Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，mIgA Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，mIgA Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

mIgA Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyC576Hu    人Lacritin蛋白(LACRT)檢測試劑盒    ELISA Kit for Lacritin (LACRT)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC896Hu    人皮敵菌素(DCD)檢測試劑盒    ELISA Kit for Dermcidin (DCD)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA314Hu    人半乳糖凝集素14(GAL14)檢測試劑盒    ELISA Kit for Galectin 14 (GAL14)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB171Hu    人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)檢測試劑盒    ELISA Kit for Transferrin ReHZptor (TFR)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB099Hu    人CD8a分子(CD8a)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 8a (CD8a)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB167Hu    人CD4分子(CD4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 4 (CD4)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA914Hu    人趨化因子C-C-基元受體2(CCR2)檢測試劑盒    ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif ReHZptor 2 (CCR2)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC057Hu    人核因子κB受體激活因子(RANκ)檢測試劑盒    ELISA Kit for ReHZptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B (RANk)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB847Hu    人極低密度脂蛋白(VLDL)檢測試劑盒    ELISA Kit for Very Low Density Lipoprotein (VLDL)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA033Eq    人干擾素α(IFNα)檢測試劑盒    ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC292Hu    人氨乙酰丙酸δ脫水酶(ALAD)檢測試劑盒    ELISA Kit for Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC343Hu    人70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)檢測試劑盒    ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 5 (HSPA5)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC906Hu    人成纖維細(xì)胞生長因子3(FGF3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 3 (FGF3)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC086Hu    人Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體C(MHCC)檢測試劑盒    ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class I C (MHCC)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB516Hu    人凸素1(PROM1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Prominin 1 (PROM1)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC003Hu    人載脂蛋白B(APOB)檢測試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein B (APOB)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC695Hu    人破骨細(xì)胞關(guān)聯(lián)受體(OSCAR)檢測試劑盒    ELISA Kit for Osteoclast Associated ReHZptor (OSCAR)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB143Hu    人CD24分子(CD24)檢測試劑盒    ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 24 (CD24)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB217Hu    人透明質(zhì)酸酶(HAase)檢測試劑盒    ELISA Kit for Hyaluronidase (HAase)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC369Hu    人角化粒(CDSN)檢測試劑盒    ELISA Kit for Corneodesmosin (CDSN)     檢測范圍：9.375-1000pg/ml