ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，LTD4 Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，LTD4 Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

LTD4 Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。LTD4 Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，LTD4 Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，LTD4 Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

LTD4 Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyD934Hu    人腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 9 (TNFSF9)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD964Hu    人核受體相關(guān)蛋白1(NURR1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Nuclear ReHZptor Related Protein 1 (NURR1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE478Hu    人睪丸陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TAT1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Testis Anion Transporter 1 (TAT1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE801Hu    人AMPA離子能*受體1(GRIA1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE802Hu    人AMPA離子能*受體2(GRIA2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 2 (GRIA2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE804Hu    人AMPA離子能*受體4(GRIA4)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 4 (GRIA4)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF557Hu    人線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Uncoupling Protein 1, Mitochondrial (UCP1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyF824Hu    人易位關(guān)聯(lián)膜蛋白1(TRAM1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Translocation Associated Membrane Protein 1 (TRAM1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG301Hu    人黑素瘤缺乏因子1(AIM1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Absent In Melanoma 1 (AIM1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG753Hu    人TNF受體關(guān)聯(lián)因子3(TRAF3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for TNF ReHZptor Associated Factor 3 (TRAF3)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG755Hu    人TNF受體關(guān)聯(lián)因子5(TRAF5)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for TNF ReHZptor Associated Factor 5 (TRAF5)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH022Hu    人Toll樣受體銜接分子1(TICAM1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Toll Like ReHZptor Adaptor Molecule 1 (TICAM1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH061Hu    人TANK結(jié)合激酶1(TBK1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for TANK Binding Kinase 1 (TBK1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH596Hu    人V-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌基因同源物(MAF)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for V-Maf Musculoaponeurotic Fibrosarcoma Oncogene Homolog (MAF)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH751Hu    人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for V-Ki-Ras2 Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog (KRAS)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH821Hu    人白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 18 Binding Protein (IL18BP)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ176Hu    人早期內(nèi)體抗原1(EEA1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Early Endosome Antigen 1 (EEA1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ239Hu    人多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸轉(zhuǎn)移酶1(DPAGT1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Dolichyl Phosphate-N-AHZtylglucosaminephosphotransferase 1 (DPAGT1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ282Hu    人DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for DNA Damage Inducible Transcript 3 (DDIT3)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml