ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，HSP-90 Elisa試劑盒特別是固相載體的包被難達(dá)到各個體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，HSP-90 Elisa試劑盒中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

HSP-90 Elisa試劑盒技術(shù)操作要點：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。HSP-90 Elisa試劑盒蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，HSP-90 Elisa試劑盒直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，HSP-90 Elisa試劑盒即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

HSP-90 Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品*：xyA519Ca    狗載脂蛋白A1(APOA1)測定試劑盒    ELISA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1)     檢測范圍：18.256-1000pg/ml    
xyA811Ca    狗血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)測定試劑盒    ELISA Kit for Angiotensin I (AngI)     檢測范圍：18.256-1000pg/ml    
xyA802Ca    狗膽囊收縮素(CCK)測定試劑盒    ELISA Kit for Cholecystokinin (CCK)     檢測范圍：18.256-1000pg/ml    
xyA399Ca    狗高遷移率族蛋白1(HMG1)測定試劑盒    ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1)     檢測范圍：18.256-1000pg/ml    
xyA102Cp    羊基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)測定試劑盒    ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA108Cp    羊骨保護(hù)素(OPG)測定試劑盒    ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyC011Cp    羊補(bǔ)體因子B(CFB)測定試劑盒    ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA073Cp    羊白介素2(IL2)測定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA120Cp    羊干細(xì)胞因子(SCF)測定試劑盒    ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA123Cp    羊轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)測定試劑盒    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA051Cp    羊胰島素樣生長因子2(IGF2)測定試劑盒    ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA052Cp    羊胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)測定試劑盒    ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA129Cp    羊組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)測定試劑盒    ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA214Cp    羊窖蛋白(CAV1)測定試劑盒    ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyB949Cp    羊轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)測定試劑盒    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA133Cp    羊腫瘤壞死因子α(TNFα)測定試劑盒    ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA054Cp    羊胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)測定試劑盒    ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA055Cp    羊胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)測定試劑盒    ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml    
xyA056Cp    羊白介素10(IL10)測定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)     檢測范圍：19.567-1000pg/ml