ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，HSP47 Elisa試劑盒特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，HSP47 Elisa試劑盒中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

HSP47 Elisa試劑盒技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。HSP47 Elisa試劑盒蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，HSP47 Elisa試劑盒直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴(lài)氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，HSP47 Elisa試劑盒即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類(lèi)物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

HSP47 Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品*：xyB949Eq    馬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA131Fi    斑馬魚(yú)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA133Eq    馬腫瘤壞死因子α(TNFα)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA054Eq    馬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA054Fi    斑馬魚(yú)胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 (IGFBP3)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA216Eq    馬單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 4 (MCP4)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA056Eq    馬白介素10(IL10)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA058Eq    馬白介素12B(IL12B)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA058Fi    斑馬魚(yú)白介素12B(IL12B)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA059Eq    馬白介素12A(IL12A)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA060Eq    馬白介素13(IL13)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 13 (IL13)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA061Fi    斑馬魚(yú)白介素15(IL15)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA153Eq    馬甲胎蛋白(αFP)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA007Eq    馬血管生長(zhǎng)素(ANG)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Angiogenin (ANG)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA063Eq    馬白介素17(IL17)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA220Eq    馬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA223Eq    馬白介素1受體拮抗劑(IL1RA)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA222Eq    馬干擾素β(IFNβ)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA064Eq    馬白介素18(IL18)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA225Eq    馬心鈉肽(ANP)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA164Eq    馬泛素(Ub)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Ubiquitin (Ub)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA071Eq    馬白介素1α(IL1α)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml    
xyA072Eq    馬防御素β2(DEFβ2)測(cè)定試劑盒    ELISA Kit for Defensin Beta 2 (DEFb2)     檢測(cè)范圍：20.789-1000pg/ml