ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，HSA Elisa試劑盒特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，HSA Elisa試劑盒中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。

HSA Elisa試劑盒技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。HSA Elisa試劑盒蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，HSA Elisa試劑盒直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，HSA Elisa試劑盒即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。

脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

HSA Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品*：xyA026Hu    人趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA027Hu    人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)檢測試劑盒    ELISA Kit for Erythropoietin ReHZptor (EPOR)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA028Hu    人紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測試劑盒    ELISA Kit for Erythropoietin (EPO)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA029Hu    人E選擇素(SELE)檢測試劑盒    ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA030Hu    人凋亡相關(guān)因子(FAS)檢測試劑盒    ELISA Kit for Factor Related Apoptosis (FAS)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA031Hu    人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)檢測試劑盒    ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA032Hu    人酸性成纖維細(xì)胞生長因子(FGF1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 1, Acidic (FGF1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA034Hu    人成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA035Hu    人成纖維細(xì)胞生長因子6(FGF6)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 6 (FGF6)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA036Hu    人成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA037Hu    人纖連蛋白(FN)檢測試劑盒    ELISA Kit for Fibronectin (FN)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA038Hu    人FMS樣*激酶3配體(Flt3L)檢測試劑盒    ELISA Kit for FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand (Flt3L)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA039Hu    人FMS樣*激酶3(Flt3)檢測試劑盒    ELISA Kit for FMS Like Tyrosine Kinase 3 (Flt3)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA040Hu    人趨化因子C-X3-C-基元配體1(CX3CL1)檢測試劑盒    ELISA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1 (CX3CL1)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA041Hu    人中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)檢測試劑盒    ELISA Kit for Neutrophil Activating Protein 3 (NAP3)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA042Hu    人粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒    ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA043Hu    人膠質(zhì)細(xì)胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glial HZll Line Derived Neurotrophic Factor (GDNF)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA044Hu    人生長激素(GH)檢測試劑盒    ELISA Kit for Growth Hormone (GH)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA045Hu    人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒    ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA046Hu    人糖蛋白130(gp130)檢測試劑盒    ELISA Kit for Glucoprotein 130 (gp130)    檢測范圍：9.375-1000pg/ml