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1．回溫平衡：
在加樣之前約半小時左右，把試劑盒從冰箱中取出，放置在室溫下進行平衡，平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進行快速回溫。ELISA試劑盒
2．加樣：
取出相應數量的微孔板放置在板架上，然后再對板孔進行編號，再對需要稀釋的抗體或酶標記物進行稀釋。在板孔的前六個孔內分別加入標準品1-6，然后在剩下的板孔內加入樣品分析液。然后再在每孔內加入其余需要加入的液體。蓋上蓋板膜以后小幅度振蕩，然后放置在相應的環境中進行反應。如是25℃環境反應，則可放置在空調房內進行反應；如果是37℃環境下反應，則必須放置在37℃恒溫培養箱里進行反應，如果是4℃環境下反應，則必須放置在2-8度冰箱里進行培養。
3．反應時間：
盡量把時間控制在需要的反應時間，如果時間比較緊迫的話也可以把時間稍微延長幾分鐘，但不宜太長。顯色時間可根據顏色深淺進行調整。ELISA試劑盒
4．洗板：
把板內液體甩干，加入稀釋好的洗液250ul/孔，靜置10s或稍作振蕩后甩掉孔內液體，再次加入洗液，以此重復3-4遍，洗完以后利用吸水紙把孔內液體充分拍干后進行下一步操作，如果孔內有氣泡，則利用干凈的槍頭刺破。ELISA試劑盒
5 結束實驗:
把加樣槍全部調到zui大量程,試劑盒放入冰箱,試管及離心管進行清洗,關閉不用的儀器.
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