一、 概述

    可溶性抗原（如細(xì)菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他來源的蛋白質(zhì)、多糖質(zhì)、類脂體等）與其相應(yīng)的抗體相遇后，在電解質(zhì)參與下，抗原抗體結(jié)合形成白色絮狀沉淀，出現(xiàn)白色沉淀線，此種現(xiàn)象稱為沉淀反應(yīng)。沉淀反應(yīng)中的抗原叫沉淀原（precipitinogen）,與沉淀原發(fā)生反應(yīng)的抗體稱為沉淀素（precipitin）。沉淀反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制與凝集反應(yīng)基本相同。不同之點(diǎn)是：沉淀原分子小，單位體積內(nèi)總面積大，故在定量試驗(yàn)時(shí)，通常稀釋抗原。

    沉淀反應(yīng)主要包括有環(huán)狀沉淀反應(yīng)、絮狀沉淀反應(yīng)和瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)。

    環(huán)狀沉淀反應(yīng)是zui早的沉淀反應(yīng)，目前在鏈球菌的分類、鑒定，昆蟲吸血性能及所吸血液來自何種動(dòng)物的鑒別，肉品種屬鑒定及炭疽尸體與皮張的檢驗(yàn)工作中仍然應(yīng)用。主要是用已知的抗體診斷未知的抗原。

    絮狀沉淀反應(yīng)是將抗原與血清在試管內(nèi)混合，在電解質(zhì)存在的情況下，抗原抗體復(fù)合物可形成混濁沉淀或絮狀沉淀凝聚物，此法通常用于毒素與抗毒素的滴定。

    瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散（Agar－gel immunodiffusion）是沉淀反應(yīng)的一種形式，是指抗原抗體在瓊脂凝膠內(nèi)擴(kuò)散，特異性的抗原抗體相遇后，在凝膠內(nèi)的電解質(zhì)參與下發(fā)生沉淀，形成可見的沉淀線。這種反應(yīng)簡(jiǎn)稱瓊脂擴(kuò)散。

    抗原抗體擴(kuò)散使用的凝膠種類很多，除瓊脂外還有明膠、果膠、聚丙烯酰胺等，因此總的名稱叫免疫擴(kuò)散（Immunodiffusion 簡(jiǎn)寫為ID）。瓊脂擴(kuò)散是免疫擴(kuò)散中的一種方法。

    瓊脂擴(kuò)散的原理是：物質(zhì)自由運(yùn)動(dòng)形成擴(kuò)散現(xiàn)象，擴(kuò)散可以在各種介質(zhì)中進(jìn)行。我們所使用的％～2%的瓊脂凝膠，瓊脂形成網(wǎng)狀構(gòu)架，空隙中是 98％~99%的水，擴(kuò)散就在此水中進(jìn)行。％~2%瓊脂所形成的構(gòu)架網(wǎng)孔較大，允許分子量在20萬以下甚至更大些的大分子物質(zhì)通過，絕大多數(shù)可溶性抗原和抗體的分子量在20萬以下，因此可以在瓊脂凝膠中自由擴(kuò)散，所受阻力甚小。二者在瓊脂凝膠中相遇，在zui適比例處發(fā)生沉淀，此沉淀物因顆粒較大而不擴(kuò)散，故形成沉淀帶。

    一種抗原抗體系統(tǒng)只出現(xiàn)一條沉淀帶，復(fù)合物抗原中的多種抗原抗體系統(tǒng)均可根據(jù)自己的濃度、擴(kuò)散系數(shù)、zui適比等因素形成自己的沉淀帶。本法的主要優(yōu)點(diǎn)是能將復(fù)合的抗原成分加以區(qū)分，根據(jù)沉淀帶出現(xiàn)的數(shù)目、位置以及相鄰二條沉淀帶之間的融合、交叉、分枝等情況，就可了解該復(fù)合抗原的組成。

二、環(huán)狀沉淀反應(yīng)

    以炭疽環(huán)狀沉淀反應(yīng)為例，此反應(yīng)又稱Ascoli氏反應(yīng)。

（一）材料與試劑

．已知炭疽沉淀血清，購(gòu)買自生物制品所。

2．待測(cè)炭疽沉淀抗原

3．試管5mm×50mm、滴管

4．0.3%石炭酸生理鹽水

（二）操作方法

．待測(cè)抗原的提取

（）取可疑為炭疽而死的病畜的實(shí)質(zhì)臟器g，放入試管或小三角燒瓶中，加生理鹽水5ml～0ml，煮沸30min～40min，冷卻后用濾紙過濾得清澈的液體，即為待測(cè)抗原。

（2）如病料是皮張，可采用冷浸法。將樣品高壓滅活后，剪成小塊并稱重，加約5倍的0.5%生理鹽水，室溫浸泡8h～24小時(shí)，濾紙過濾，即為待檢抗原。抗體