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原代細胞的分離方法

時間：2016/4/20閱讀：1047

①過夜冷消化將取得的組織用 Hanks 液洗三次，剪成碎塊大小為 4 毫米左右，用 Hanks 液洗 2~3 次以除去血球和脂肪組織，再加入 0.25% 的，搖勻后放 4℃過夜，次日再用 Hanks 液洗滌，棄去上清，共洗 2~3 次，然后，加入少量營養(yǎng)液吹打分散，細胞計數(shù)，按適當?shù)臐舛确制颗囵B(yǎng)。

②多次提取消化法多次提取消化法有以下三種：

熱消化多次提取 -- 將剪碎的細胞塊加入 0.25% 37℃水浴中消化 5~20 分鐘，然后經(jīng)洗滌后用營養(yǎng)液分散制成細胞懸液，按合適的濃度分瓶培養(yǎng)，然后將留下的未*消化的組織按上述方法操作，再消化提取細胞。

冷消化多次提取 -- 方法同上，只是消化溫度為 4℃。

先熱消化后冷消化 -- 將組織塊先用于 37℃下消化 20 分鐘經(jīng)洗滌后用營養(yǎng)液分散，制成懸液，剩余未消化的小組織塊經(jīng)洗滌后用于 4℃下過夜，次日再提取細胞，分散成懸液，分瓶培養(yǎng)。

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