2018 09-07

CLONE9細(xì)胞株的使用說明

CLONE9細(xì)胞株的使用說明一.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。用PBS2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，...

2018 07-03

實(shí)驗(yàn)室的好習(xí)慣，你一直在保持嗎？

實(shí)驗(yàn)中的每個(gè)環(huán)節(jié)都很重要，忽略任何一個(gè)都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。良好的習(xí)慣可以提高工作效率、降低實(shí)驗(yàn)成本！良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣就是實(shí)驗(yàn)成功的基礎(chǔ)。下面的內(nèi)容希望對(duì)大家有用。實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備一定要充足哦1.實(shí)驗(yàn)前一定...

2018 05-10

復(fù)雜的細(xì)胞提取和培養(yǎng)方法看這里！

科研實(shí)驗(yàn)都離不開細(xì)胞的培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)的好壞關(guān)乎實(shí)驗(yàn)的zui終結(jié)果，下面我們整理了一些難養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)方法.1）球體細(xì)胞培養(yǎng)：1.瓊脂鋪底的培養(yǎng)瓶：30ml無菌培養(yǎng)瓶，每瓶中加5ml2%瓊脂培養(yǎng)基，冷卻，...

2018 03-30

普通細(xì)胞培養(yǎng)基配置

準(zhǔn)備和安裝過濾器清洗好過濾器，干燥，放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜，用布包裝好，15磅20min進(jìn)行高壓滅菌處理。在超凈臺(tái)內(nèi)打開過濾器架好，膠管一端接入濾泵再插入待除菌的液體中，出口端膠管深入到已...

2018 03-26

細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)問題，請(qǐng)看這里

培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，時(shí)常會(huì)遇到各種的問題，怎么辦？以下是整理的一些常用問題的解決辦法。01培養(yǎng)液pH值變化太快可能原因：(1)CO2張力不對(duì)(2)培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊(3)NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足(4...

2018 03-08

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法

一、注射給藥法1.皮下注射注射時(shí)用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入，固定后即可進(jìn)行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或側(cè)下腹部；豚鼠在后大腿內(nèi)側(cè)、背部等脂肪少的部位；兔在背部...

2018 01-12

誘發(fā)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝癌的幾種方法

造模原理：利用外源性化學(xué)致癌因素引起細(xì)胞遺傳特性異常，呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增值活性，形成癌癥。常用的致癌物質(zhì)有：DEN（乙亞硝基胺）、DBA（4-二甲基氨基偶氮苯、2AAF（2-乙酰氨基酸）、OAAT（...

2018 01-10

小鼠腫瘤模型

腫瘤模型我們一般常用的就是小鼠模型和人腫瘤裸小鼠移植瘤模型。其中用得zui多的是皮下模型，另外還有腹水（或者尾靜脈注射）以及原位模型，其他的模型很少用，就不提他們了。小鼠模型分三大類：*類是以S180...

2017 08-14

干細(xì)胞老化有什么表現(xiàn)？如何預(yù)防？

干細(xì)胞在培養(yǎng)過程中如果環(huán)境不適合其生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞的老化現(xiàn)象。這是干細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)難點(diǎn)也是經(jīng)常出現(xiàn)的問題。本文描述干細(xì)胞老化時(shí)出現(xiàn)的跡象，以及其預(yù)防措施。干細(xì)胞老化的表現(xiàn)★細(xì)胞胞漿內(nèi)特別是在核區(qū)附...

2017 08-11

子實(shí)生物：消滅PCR非特異性擴(kuò)增的黃金方法！

給各位小伙伴腦補(bǔ)一下非特異性擴(kuò)增，即進(jìn)行PCR所擴(kuò)增出來的條帶不是所要的，引物與模板在非目的條帶處有錯(cuò)配，導(dǎo)致延伸產(chǎn)物不是目的條帶。例如引物二聚體，即引物在退火過程中產(chǎn)生了hairpin結(jié)構(gòu)或其他二級(jí)...

2017 08-01

子實(shí)經(jīng)驗(yàn):怎么樣選擇合適的Western blot封閉液？

在做Westernblot實(shí)驗(yàn)中，會(huì)用到固相載體(如NC膜，PVDF膜)，在這些固相載體表面有很多洞洞，通過電轉(zhuǎn)，膠上的蛋白被轉(zhuǎn)移到膜上，蛋白以機(jī)械*(堆積)和吸附的方式結(jié)合于表面。蛋白塞進(jìn)了表面的很...

2017 07-31

子實(shí)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇：細(xì)胞凋亡檢測(cè)指標(biāo)及凋亡分析的總體原則！！！

今天我們給大家?guī)淼氖羌?xì)胞凋亡過程中我們有哪些指標(biāo)的檢測(cè)。01class細(xì)胞凋亡早期細(xì)胞凋亡比較早期時(shí)，細(xì)胞膜即出現(xiàn)了一些改變，細(xì)胞膜磷脂雙分子層中的磷脂酰*從細(xì)胞膜內(nèi)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜外，暴露于細(xì)胞膜；A...

2017 07-28

子實(shí)生物經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇： 你的細(xì)胞該選用哪種培養(yǎng)基才能養(yǎng)好細(xì)胞

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用z...

2017 07-24

子實(shí)生物：細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的？如何凍存和復(fù)蘇細(xì)胞？

科幻電影中將凍存若干年的生命體重新解凍復(fù)活的情節(jié)在生命科學(xué)研究過程中每一天都在上演。為了將每一種有生命的細(xì)胞較好的保存其原有的細(xì)胞特性或者長(zhǎng)久的保存種質(zhì)資源，實(shí)驗(yàn)人員往往將細(xì)胞用特殊配置的細(xì)胞凍存液保...

2017 07-23

子實(shí)生物經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇：如何選擇流式細(xì)胞術(shù)常用的熒光素 ？

流式細(xì)胞儀測(cè)定常用的熒光染料有很多種，我們?nèi)绾蝸磉x擇流式細(xì)胞儀測(cè)定的常用熒光染料呢？以下簡(jiǎn)單介紹了熒光素選擇的幾個(gè)原則。1.抗原的密度①高表達(dá)的抗原可選擇幾乎所有的熒光素；②低密度表達(dá)的抗原需要可提供...

2017 07-22

子實(shí)生物、實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇：細(xì)胞培養(yǎng)的成功因素之一細(xì)胞消化

1.絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用*潤(rùn)洗一遍即可。吸去*后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量*在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用*孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞...

2017 07-21

子實(shí)生物經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇:如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)的冷凍保護(hù)劑？

冷凍保護(hù)劑是指可以保護(hù)細(xì)胞免受冷凍損傷的物質(zhì)。冷凍保護(hù)劑常常配制成一定的溶液。一般來講，只有紅細(xì)胞、大多數(shù)微生物和極少數(shù)有核的哺乳動(dòng)物細(xì)胞懸浮在不加冷凍保護(hù)劑的水或簡(jiǎn)單的鹽溶液中，并以zui適的冷凍速...

2017 07-20

子實(shí)生物經(jīng)驗(yàn)總結(jié)：生物實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理，需要注意哪幾個(gè)方面？

許多生物實(shí)驗(yàn)室存在嚴(yán)重的污染問題，而其中又以廢液廢品的處理為zui，大部分實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行生物實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的大量高濃度含有害微生物的培養(yǎng)液、培養(yǎng)基，未經(jīng)適當(dāng)?shù)臏缇幚矶苯油馀牛以S多實(shí)驗(yàn)室的下水道與...

2017 07-19

子實(shí)生物、實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇：免疫組化常見問題的處理

子實(shí)生物、實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇：免疫組化常見問題的處理確認(rèn)是否忽略了應(yīng)該加的某種試劑，包括一抗、二抗、三抗及底物等。確認(rèn)所有的試劑是否按正確的順序加入，是否孵育了足夠的時(shí)間。對(duì)照抗體的標(biāo)簽確認(rèn)是否使用了正...

2017 07-18

子實(shí)生物、實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)總結(jié)篇：細(xì)胞培養(yǎng)瓶的選擇

細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)...