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ELISA試劑盒樣本處理及要求

時間:2013/7/26閱讀:1523
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ELISA試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上
清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 
2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心
20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 
3. 尿液:用無菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分) 。仔細收集上清,保存過程
中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/
分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度
達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右
(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。ELISA試劑盒保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標
本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分) 。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其
余冷凍備用。 
注意事項: 
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進
行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. 
2.ELISA試劑盒不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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