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腫瘤標(biāo)志物酶聯(lián)免疫測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化

時(shí)間：2011/12/12閱讀：1454
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 腫瘤標(biāo)志物較多，下面主要談一談AFP，PSA和CEA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化問(wèn)題。AFP由于其具有相對(duì)的肝臟特異性，在臨床上主要用于原發(fā)性肝癌的輔助診斷，此外還可用于妊娠中3個(gè)月胚胎21三體型（Down綜合征）的母體篩檢。在原發(fā)性肝癌的診斷中，雖不要求有非常準(zhǔn)確的量，但表示異常的參考值的確定對(duì)該項(xiàng)測(cè)定的價(jià)值很重要。

不同廠家試劑、不同方法間的參考值有可能不一樣，這就需要在建立方法時(shí)，用大量的實(shí)驗(yàn)及標(biāo)準(zhǔn)晶來(lái)證實(shí)。AFP用在Down綜合征的篩檢更需要AFP測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化，因?yàn)楹Y檢時(shí)，在妊娠的每一周，都要將AFP的濃度轉(zhuǎn)換成一參考人群中值的倍數(shù)，因此，在測(cè)定校準(zhǔn)上的小的差異都會(huì)對(duì)后面危險(xiǎn)因子的計(jì)算有很大的影響，故每一個(gè)篩檢實(shí)驗(yàn)室都必須分別建立其自己的參考值。AFP標(biāo)準(zhǔn)（1S）1U大約相當(dāng)于1．2Pg。

PSA是一種分子量為30kD的絲氨酸蛋白酶，當(dāng)其進(jìn)入血液循環(huán)時(shí)即與蛋白酶抑制物形成復(fù)合物，血清中約50％～98％免疫反應(yīng)性PSA以與。：—抗糜蛋白酶（ACT）結(jié)合的形式存在，其余大部分是游離，少部分與。：—抗胰蛋白酶結(jié)合，血清中還含有用通常的免疫測(cè)定方法測(cè)不出的PSA-。：—巨球蛋白（AMG）復(fù)合物。

目前已有的PSA測(cè)定方法對(duì)PSA-ACT的測(cè)定能力各有不同，在該復(fù)合物中有一些PSA的決定簇被ACT所覆蓋，從而導(dǎo)致其與多克隆抗體的反應(yīng)性降低。目前PSA的免疫測(cè)定幾乎均使用依據(jù)兩個(gè)單抗或一個(gè)單抗和一個(gè)多抗的雙抗夾心模式，后者常造成PSA-ACT測(cè)定結(jié)果偏低，但使用某些單抗時(shí)亦如此，在某些測(cè)定方法中，通過(guò)將其與一個(gè)平衡測(cè)定兩種成分的方法進(jìn)行比對(duì)校準(zhǔn)而對(duì)原方法的偏低結(jié)果進(jìn)行補(bǔ)償。PSA測(cè)定的另一個(gè)問(wèn)題是校準(zhǔn)品的基質(zhì)，如果將純化的PSA加入至血清中，將形成與ACT和AMG的復(fù)合物，但由于PSA試驗(yàn)不能測(cè)定PSA-AMG復(fù)合物，于是有大約30％～45％的PSA不能測(cè)出，因此，應(yīng)使用血清作為PSA校準(zhǔn)品的基質(zhì)，這樣才能反映PSA在血液中的真實(shí)情況。

一個(gè)合作研究研制了一個(gè)PSA參考標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)品由10％游離PSA和90％PSA-ACT組成，使用該標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)的測(cè)定試驗(yàn)給出了相似的結(jié)果，盡管其并沒有以等摩爾的方式測(cè)定每一種形式的PSA。使有這種標(biāo)準(zhǔn)品可迅速地改善不同測(cè)定試驗(yàn)之間結(jié)果的可比性。由于在前列腺癌患者中PSA-ACT所占總PSA的比例遠(yuǎn)高于良性前列腺疾病，因此，可通過(guò)分別測(cè)定PSA和PSA-ACT，然后計(jì)算其比例而提高PSA測(cè)定的診斷價(jià)值。

故而有必要對(duì)這兩種形式的PSA分別制備標(biāo)準(zhǔn)品。臨床上PSA的測(cè)定已越來(lái)越多地用于前列腺癌的篩查，在測(cè)定校準(zhǔn)上的微小差異也會(huì)對(duì)篩檢為陽(yáng)性的男性的數(shù)量有較大影響，因此，PSA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化極為重要。

由于CEA有一族相關(guān)的抗原，因而其特異的測(cè)定較為麻煩。例如，正常交叉反應(yīng)抗原NCA）由粒細(xì)胞產(chǎn)生，在血循環(huán)中以相當(dāng)高的濃度出現(xiàn)。NCA-2是CEA的一個(gè)胚胎性（糖基化）變異體，此兩種抗原均由成人和胚胎結(jié)腸黏膜產(chǎn)生，某些癌癥患者，產(chǎn)生的CEA部份是胚胎型（NCA-2）的。目前已有的CEA測(cè)定試劑與NCA無(wú)甚交叉反應(yīng)，但與NCA-2則有不同程度的反應(yīng)性，這一點(diǎn)以及CEA的不均一性說(shuō)明了在不同CEA測(cè)定試劑間的差異存在的原因。已有CEA的標(biāo)準(zhǔn)品，但其一般以質(zhì)量單位表示。
 

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