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廣東環凱生物科技有限公司
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022182四環素檢定培養基用途：四環素檢定培養基用于四環素族殘留的一種微生物學檢定(GB/T9695.16-88和SN0179-92)
022182 四環素檢定培養基
用 途：
四環素檢定培養基用于四環素族殘留的一種微生物學檢定(GB/T9695.16-88和SN0179-92)。
原 理：
本法系利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用，抑菌圈直徑與抗生素的濃度或活性有關;比較標準品與供試品兩者對接種的試驗菌產生抑菌圈的大小，以測定供試品效價或樣品中四環素殘留的一種微生物學方法。
配方(每升)：
胰蛋白胨 6g
牛肉膏粉 1.5g
酵母膏粉 3g
瓊脂 14g
最終pH 5.8±0.1
使用方法(計數用法)：
1、稱取四環素檢定培養基24.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至*溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min。
2、雙碟的制備應在無菌室或潔凈室內進行，并注意避免微生物及抗生素污染。培養基應在水浴中或微波爐內融化，避免直火加熱。
3、雙碟的底層：用滅菌大口20mL吸管或其它滅菌分裝器，吸取已融化的培養基20mL注入雙碟內，待凝固后加入菌層。(雙碟內的培養基應均勻的分布于平皿內。)
4、菌層：取出試驗用菌懸液，按預試好的加菌量[使0.05單位/mL濃度的四環素標準溶液可產生12mm以上的清晰、完整的抑菌圈]，用滅菌吸管吸取菌懸液適量，加入已融化并保溫在水浴中(水浴溫度50～60℃)的培養基內，搖勻，作為菌層培養基使用。取出加有底層培養基的雙碟，用滅菌大口5mL、10mL吸管或其他適宜分裝器，吸取菌層培養基6mL，加于底層培養基上，使其均勻攤布，等凝固后放置鋼管。
5、放置鋼管：使用鋼管放置器或小子，使鋼管平穩的落在培養基上，相應劑量的鋼管 對角均勻放置。鋼管放妥后，雙碟靜置5~10分鐘后，再開始滴加抗生素溶液。
6、c滴加抗生素溶液用滅菌毛細滴管或微量加樣器(調節加樣量約為200-300μL)，在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加標準品及樣品溶液順序，因實驗設計方法不同而異。(2.2)法，在雙碟的4個鋼管中分別成“Z"字形滴加標準品及樣品高、低兩種濃度的溶液;在(3.3)法的6個鋼管中間隔3個鋼管中分別滴加標準品及樣品高、中、低3種濃度，并使相同濃度成對角。滴加溶液至鋼管口平滿。
7、滴加完畢，用陶瓦蓋覆蓋雙碟，平穩置于雙碟托盤內，雙碟疊放不可超過3層，將雙碟托盤水平平穩地移入培養箱中間位置，在或該藥品標準規定的溫度下培養至所需時間。
8、抑菌圈測量：測量前應檢查抑菌圈是否圓整，如有破圈或圈不圓整，應舍棄該碟。可用抑菌圈測量儀或游標卡尺測量。
質量控制：
本品在滅菌后應澄清無沉淀，下列菌株接種后30~32℃培養16~18h生長情況如下表：
貯 存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。
規 格：100g
參考文獻:
1. GB/T9695.16-88 中華人民共和國國家標準 肉與肉制品四環素族抗生素殘留量檢驗
2. SN 0179-92 中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準 出口食品中四環素族抗生素殘留量檢驗方法
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