免疫磁珠捕獲與分離
應按照生產商提供的使用說明進行免疫磁珠捕獲與分離。當生產商的使用說明與下面的描述可能有偏差時，按生產商提供的使用說明進行。
將Eppendorff 管按樣品和質控菌株進行編號，每個樣品使用1 Eppendorff 管，然后插入到磁板架上。在漩渦混合器上輕輕振蕩E.coli O157 免疫磁珠溶液后，用開蓋器打開每個Eppendorff 管的蓋子，每管加入20μL E.coli O157 免疫磁珠懸液。
取mEC+n 肉湯增菌培養物1mL，加入到Eppendorff 管中，蓋上蓋子，然后輕微振蕩10s。每個樣品更換1 只加樣吸頭，質控菌株必須與樣品分開進行，避免交叉污染。
結合：在18℃～30℃環境中，將上述Eppendorff 管連同磁板架放在Dynal MX1 樣品混合器上轉動或用手輕微轉動10min，使E.coli O157 與免疫磁珠充分接觸。
捕獲：將磁板插入到磁板架中濃縮磁珠。在3min 內不斷地傾斜磁板架確保懸液中與蓋子上的免疫磁珠全部被收集起來，此時，在Eppendorff 管壁中間明顯可見圓形或橢圓形棕色聚集物。
吸取上清液：取1 支無菌加長吸管，從免疫磁珠聚集物對側深入液面，輕輕吸走上清液。當吸到液面通過免疫磁珠聚集物時，應放慢速度，以確保免疫磁珠不被吸走。
免疫磁珠的滑落：某些樣品特別是那些富含脂肪的樣品，其磁珠聚集物易于滑落到管底。在吸取上清液時，很難做到不丟失磁珠，在這種情況下，可保留50μL～100μL 上清液于Eppendorff 管中。如果在后續的洗滌過程中也這樣做的話，脂肪的影響將減小，也可達到充分捕獲的目的。
洗滌：從磁板架上移走磁板，在每個Eppendorff 中加入1mL PBS-Tween20
洗液，轉動磁板架3 次以上，洗滌免疫磁珠混合物。
免疫磁珠懸浮：移走磁板，將免疫磁珠重新懸浮在100μL PBS-Tween20 洗液中。
涂布平板
用漩渦混合器將免疫磁珠混勻，用加樣器各取50μL 免疫磁珠懸液分別轉移至CT-SMAC 平板和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板一側，然后用無菌涂布棒將免疫磁珠涂布平板的一半，再用接種環劃線接種平板的另一半。待瓊脂表面水分*吸收后，翻轉平板，于36℃±1℃培養18h～24h。
注：若CT-SMAC 平板和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板表面水分過
多時，應在37℃下干燥10min～20min，涂布時避免將免疫磁珠涂布到平板的邊緣。
