用為免疫動物產生抗體的抗原物質如果是人工合成的。質地比較純，免疫動物后可獲得質量好的抗血清。如果以從組織中提取的物質作為抗原，必須經過純化，保證提取物的純凈，才能獲得質量好的抗血清。某些物質的分子量比較小，抗原性弱，屬于半抗原，不易使動物產生抗體，必須把這些半抗原連接到大分子物質（載體）上，形成較為理想的免疫原，既能減少免疫注射的次數，又可節約抗原，產生良好的免疫效應，獲得高質量的抗體。
（一）載體
用為作為載體的物質較多，下列幾類可供選擇。
蛋白質類載體：人血清白蛋白（HSA）、牛血清白蛋白（BSA）、兔血清白蛋白（RSA）、牛甲狀腺球蛋白（TG）、血藍蛋白（Hemocyanin）以及人、牛和雞γ-球蛋白等均可作為載體。這些載體免疫活性較強，有商品供應，容易獲得，即使自選提取，操作也較方便。常用 的有TG、BSA、HAS等，以TG為好。
多肽聚合物，人工合成的多聚賴氨酸 、多聚*、多聚混合氨基酸等，可與半抗原結合，所形成的免疫原可獲高滴度、高親合度的抗血清。
大分子有機化合物和某些粉末，如聚乙烯吡咯酮、羧甲基纖維素、聚甲基丙酸酯微粒、乳膠和炭末等，可吸附半抗原，也可用來作為載體，但用這類載體合成的免疫原免疫動物，所獲抗血清的質量不穩定。
載體，尤其是大分子物質本身就是一種抗原，它們進行體內，可發揮致敏作用，激活免疫系統，從而使半抗原也可以使機體產生的抗體。因此，如果把半抗原與無免疫原性的載體結合，就不能使機體產生抗體。另外，半抗原與載體結合后，可適當延遲其降解和排出體外，從而可以發揮更久的作用。
（二）偶聯劑
半抗原和載體聯接，操作比較簡單，在一般實驗室中都可進行。但對反應條件有一定的要求：在反應過程中半抗原的免疫活性不發生改變，也不應引起載體變性到不溶解的程度。常用的方法是利用偶聯劑把半抗原和載體聯接起來。用作偶聯劑的有碳化二亞胺類、戊二醛、二異氰酸化合物和二鹵化二硝基苯等。這些偶聯劑使半抗原與載體在-COOH、-NH2或-SH等基團部位發生結合。
碳化二亞胺偶聯過程示意如下：
由反應過程可見，碳化二亞胺的偶聯作用即可以在NH2部位發生，也可發生在羧基部位。
戊二醛所起的偶合作用與碳化二亞胺有所不同，戊二醛的兩個醛基分別與載體和半抗原的-NH2結合。它起一種“橋梁”作用，而把載體與半抗原聯接在一起，其反應過程為：
在免疫原的制備中，應根據不同的半抗原選用偶聯劑。
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以制備催產素（OT）免疫原為例：
?。?）1mgOT，溶解于1ml 雙蒸餾水或0.25%醋酸溶液中。10mgTG溶解于1ml 0.1mol/LPBS（pH7.5）或蒸餾水內。
（2）把OT溶液與TG溶液振蕩混勻。
?。?）邊攪拌邊滴加入0.25%戊二醛1ml。加畢后再攪拌5～10min，在室溫下繼續反應2～3h，就可供免疫動物用。
免疫原以新制備的為好，如果一次制備了較多的免疫原，也可保存在-40℃的低溫冰箱內備用。
