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技術(shù)文章

β2微球蛋白(β2-MG)的測(cè)定

閱讀:1779發(fā)布時(shí)間:2011-6-21

β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2—MG)是正常人血清中定量存在的小分子蛋白,凡攜帶HLA的細(xì)胞均存在β2MG,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞因富有HLA,β2-MG含量相應(yīng)較高。p2—MG幾乎均在腎臟進(jìn)行分解代謝,正常情況下,β2MG可自由通過(guò)腎小球,從腎小球?yàn)V過(guò)的p2-MG 99.9%以上被近曲腎小管重吸收和分解。當(dāng)腎臟近曲小管輕度受損時(shí),P2—MG排泄量即明顯增加。p2-MG的測(cè)定有RIA、EIA等方法,現(xiàn)建立時(shí)間分辨熒光免疫分析(TrFIA)來(lái)檢測(cè)p2-MG,此法具有敏感性高,特異性強(qiáng),檢測(cè)速度快,可測(cè)范圍寬,且克服了BIA技術(shù)中核素需輻射防護(hù),半衰期短等缺點(diǎn)。但目前常用的仍是RIg.法,故介紹如下。

RIA法檢測(cè)β2MG 已有測(cè)定試劑盒供應(yīng),采用分離方法,測(cè)定范圍寬,血清和尿液樣品都無(wú)需稀釋,并可在同一標(biāo)準(zhǔn)曲線上進(jìn)行測(cè)定。

1.試劑 ①β2MG標(biāo)準(zhǔn)品:0、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0mg/L,共7瓶,按說(shuō)明書加蒸餾水溶解。零標(biāo)準(zhǔn)為液體(4mi.);②“I-β2—MG;③抗β2-MG抗體,按說(shuō)明書加蒸餾水進(jìn)行溶解;④分離試劑:使用前需充分搖勻。

2.結(jié)果處理 以β2-MG標(biāo)準(zhǔn)晶的log值為橫坐標(biāo),以B/Bo%為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,或采用log-logit直線回歸等方法作圖。樣品值可根據(jù)其B/Bo%在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得,或通過(guò)計(jì)算求出樣品中P2—MG的含量。由于尿液樣品為200/xL,是血清標(biāo)本(50btL)體積的4倍,故由曲線查得的尿樣結(jié)果應(yīng)除以4,方是尿樣中β2MG的實(shí)際含量。

3.注意事項(xiàng) 血清或血漿標(biāo)本在4~C可保存2-4周;—20℃可保存半年。但尿液中β2MG的穩(wěn)定性受pH值的影響,酸性尿特別是pH5.2以下極易分解,因而取得隨意尿標(biāo)本后,需用lmol/LNaOH調(diào)至pH7.0~7.5,—20~C可保存4周。測(cè)定前要離心沉淀,以避免受沉淀物干擾。

4.正常參考值 血清:1.615±0.335m9/L;尿:0.091±0.068mg/L。但由于方法不同,
所測(cè)得結(jié)果有很大差異,故各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)所用試劑盒,測(cè)出各自正常值范圍。

5.臨床意義 在實(shí)質(zhì)性腫瘤中,原發(fā)性肝癌、肺癌、胃癌、大腸癌等均見血清β2-MG測(cè)定值升高,其中原發(fā)性肝癌患者的陽(yáng)性率zui高。在造血系統(tǒng)惡性腫瘤中,幾乎所有的慢性淋巴細(xì)胞白血病患者均見血清p2•MG呈高值,且其值與腫瘤的范圍和進(jìn)展呈顯著相關(guān)。當(dāng)腎小球?yàn)V過(guò)率下降而血清肌酐正常者,一部分患者血清β2-MG即上升,故作為腎小球?yàn)V過(guò)率的指標(biāo)有臨床實(shí)用價(jià)值。如急、慢性腎小球腎炎、尿毒癥等明顯升高;糖尿病腎病患者β2-MG均異常;腎移植成功后血β2-MG很快下降,如血β2-MG突然再次上升,說(shuō)明有排斥反應(yīng)。自身免疫性疾患,如SLE、干燥綜合癥、橋本甲狀腺炎、自身免疫性溶血性貧血患者血清β2MG呈高值。血β2MG測(cè)定,還可作為肝臟疾患活動(dòng)度的檢測(cè)指標(biāo)。AIDS病患者血清β2MG可增高。惡性胸、腹水的β2MG與血清β2MG之比值大于1.3。

尿中β2MG增加的機(jī)制有兩種:①腎小管機(jī)能障礙。主要見于先天性代謝異常如范可尼綜合征、*尿癥、半乳糖血癥、Wilson病等;重金屬中毒(如鎘中毒所致腎小管損害時(shí),尿p2•MG可達(dá)正常值的100—1 000倍),以及繼發(fā)性腎損害(如流行性出血熱等疾患)及藥物性腎損害。當(dāng)腎小管凈重吸收率只要減少1%,尿β2-MG排出量就要增加30倍,故尿p2-MG測(cè)定是診斷腎小管損害非常靈敏的試驗(yàn);②血清β2MG明顯上升時(shí)。主要見于腎小球機(jī)能障礙,腎功能不全;自身免疫性疾患;惡性腫瘤;肝臟疾患以及器官移植后的排斥反應(yīng)時(shí)。
 


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