（1）超速離心法：根據(jù)膠體金顆粒的大小，標(biāo)記蛋白的種類及穩(wěn)定劑的不同選用不同的離心速度和離心時間。
用BSA做穩(wěn)定劑的膠體金—羊抗兔IgG結(jié)合物可先低速離心（20nm金膠粒用1 200r/min，5nm金膠粒用1 800r/min）20min，棄去凝聚的沉淀。然后將5nm膠體金結(jié)合物用6 000g，4℃離心1h；20nm～40nm膠體金結(jié)合物，14 000g，4℃離心1h。仔細(xì)吸出上清，沉淀物用含1％BSA的PB液（含0.02％NaN3），將沉淀重懸為原體積的1／10，4℃保存。如在結(jié)合物內(nèi)加50％甘油可貯存于-18℃保存一年以上。
為了得到顆粒均一的免疫金試劑，可將上述初步純化的結(jié)合物再進(jìn)一步用10％～30％蔗糖或甘油進(jìn)行密度梯度離心,分帶收集不同梯度的膠體金與蛋白的結(jié)合物。
（2）凝膠過濾法：此法只適用于以BSA作穩(wěn)定劑的膠體金蛋白結(jié)合物的純化。將膠體金蛋白結(jié)合物裝入透析袋，在硅膠中脫水濃縮至原體積的1／5～1／10。再經(jīng)1 500r/min離心20min。取上清加至Sephacryl S-400（丙烯葡聚糖凝膠S-400）層析柱分別純化。層析柱為0.8 cm×20cm，加樣量為床體積的1／10，以0.02Mol/L PBS液洗脫（內(nèi)含0.1％BSA，0.05％NaN3，pH8.2者用IgG標(biāo)記物），流速為8ml/h。
按紅色深淺分管收集洗脫液。一般先濾出的液體為微黃色，有時略混濁，內(nèi)含大顆粒聚合物等雜質(zhì)。繼之為純化的膠體金蛋白結(jié)合物，隨濃度的增加而紅色逐漸加深，清亮透明，zui后洗脫出略帶黃色的為標(biāo)記的蛋白組分。將純化的膠體金蛋白結(jié)合物過濾除菌、分裝,4℃保存。zui終可得到70％～80％的產(chǎn)量。
