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考馬斯亮藍相關信息說明

閱讀：934發布時間：2011-06-02

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考馬斯亮藍屬于三苯甲烷類染料，可與蛋白質形成較強的非共價復合體。考馬斯亮藍R250多用于聚丙烯酰胺凝膠電泳后蛋白質條帶的染色；考馬斯亮藍G250是布拉德福德（Bradford）蛋白質定量試劑的主要成分。 廣泛用于對電泳蛋白質染色的藍色染料。也可顯示出細胞骨架及蛋白質在細胞中的顯微分布。

 

考馬斯亮藍G-250在游離狀態下呈紅色，zui大光吸收在465nm；當它與蛋白質結合后變為青色，蛋白質-色素結合物在595nm波長下有zui大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成正比。 考馬斯亮藍R250與蛋白質反應雖然比較緩慢，但是可以被洗脫下去，所以可以用來對電泳條帶染色。

 

考馬斯亮藍一定范圍內與蛋白質濃度成正比，因此可用于蛋白質的定量測定。蛋白質與考馬斯亮藍G-250結合在2min左右的時間內達到平衡，完成反應十分迅速；其結合物在室溫下1h內保持穩定。該法是1976年Bradford建立，試劑配制簡單，操作簡便快捷，反應非常靈敏，靈敏度比Lowry法還高4倍，可測定微克級蛋白質含量，測定蛋白質濃度范圍為0～1 000μg/mL，是一種常用的微量蛋白質快速測定方法。

 

考馬斯亮藍有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍G250由于與蛋白質的結合反應十分迅速，常用來作為蛋白質含量的測定。考馬斯亮藍R250與蛋白質反應雖然比較緩慢，但是可以被洗脫下去，所以可以用來對電泳條帶染色。

 


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