圖像流式細胞儀——流式細胞術的突破

 ImageStream是一種臺式多譜段成像流式細胞儀（Multispectral Imaging Flow Cytometry），能夠同時采集6個檢測通道中的細胞圖像。它將流式細胞檢測與熒光顯微成像結合于一身，既能提供細胞群的統計數據，又可以獲得單個細胞的圖像，從而提供細胞形態學、細胞結構和亞細胞信號分布的信息。
    細胞分析實驗中，常用的兩種方法為顯微成像觀測和流式細胞術；但是幾乎所有的用戶都會為顯微成像觀測法分析細胞數量太有限、統計學分析非常繁瑣以及流式細胞術無法觀測細胞形態、結構，無法定位熒光信號到特定部位而煩惱，但是從現在起，您大可不必為此煩惱了，位于美國華盛頓州西雅圖的Amnis公司生產的ImageStream 100很好地解決了這一問題，它將流式多色檢測技術和熒光顯微鏡圖像顯示技術集中在一個平臺上，提供了全新的細胞分析方法。
    與傳統流式細胞儀很類似，ImageStream也是由液流系統，光學系統和電子系統等三大部分組成。液流系統將樣本細胞懸液和系統鞘液注入流動室中，使細胞在鞘液流的約束下聚焦在液流的中心，逐個流過檢測窗口。光學系統中光源照射通過檢測窗口的細胞，從而產生光信號。光源分為兩種，其一是用于產生明場細胞圖像的鹵燈（Brightfield Illuminator），另一種是用于產生熒光細胞圖像的激光器。光源照射細胞產生的光信號被具有很大數值孔徑（NA：0.75）的物鏡收集，然后通過光路系統傳遞到由二向色鏡構成的濾光片堆棧（Dichroic Filter Stack），光信號在這里被分成不同波段投射到一個六通道冷CCD上，產生一個明場細胞圖像，一個暗場細胞圖像（Side Scatter，SSC）及四個不同熒光通道的細胞圖像。ImageStream的光路系統能夠自動調整焦距，并實時測定細胞運動速度，而其冷CCD采用時間延遲積分方式（Time Delay Integration，TDI）進行信號采集，上述這些手段保證了系統采集到的細胞圖像的質量。
    ImageStream系統還配有功能強大的數據分析軟件IDEAS，可以對每個細胞分析超過500種量化參數。這些參數不僅包括細胞整體的散射光和熒光信號強度，還包括對細胞形態，細胞結構及亞細胞信號分布的分析。通過在細胞群體中對這些參數進行統計，分析軟件可以生成細胞群體的散點圖和柱狀圖，而這些統計數據與細胞圖像是*整合的，比如點擊散點圖上的點，就可以直觀的看到這個點代表的細胞的圖像。另外，使用者還能夠根據自身研究的特殊需要，進行自定義參數的設定，進行更深入的分析。
    ImageStream圖像流式細胞儀的應用范圍十分廣泛，除了能夠完成傳統流式細胞儀能夠完成的工作，它還能進行亞細胞定位、細胞周期、高通量FISH分析、分子轉運示蹤、細胞內吞等諸多傳統流式細胞儀不能完成的研究工作。