13585831301
當前位置：上海莼試生物技術有限公司>>技術文章>>貼壁細胞染色步驟
一、染液制備
1. 稱取0.5g吉姆薩粉和22ml甘油；細胞
2. 取少量甘油與吉姆薩粉在研缽內充分混合，研磨至無顆粒；
3. 將剩余的甘油倒入研缽，于56℃保溫2h；
4. 加入33ml純甲醇混勻，即為吉姆薩母液，將其保存于棕色試劑瓶內；
5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen緩沖液和1份吉姆薩母液混合即得染色液。
二、 貼壁細胞染色步驟
1. 去除培養(yǎng)器皿內的培養(yǎng)液，用*反復漂洗單層培養(yǎng)物2次；
2. 加入*，再逐滴加入等體積甲醇，邊加邊混合，靜置10min；
3. 將50%甲醇-BSS混合液丟棄，加入新鮮的甲醇液浸泡固定細胞10min，然后用甲醇漂洗細胞1次；
4. 將瓶內細胞干燥后儲存或直接染色；
5. 按2ml/cm2 的比例滴加吉姆薩染液，覆蓋細胞層，染色2min；
6. 移除染液，用自來水沖洗掉粉紅色背景后，再用去離子水沖洗細胞；
7. 用顯微鏡觀察單層潮濕細胞。若細胞已干，可重新使細胞潮濕后再觀察。
三、 結果：
細胞核被染成紫紅色或紫藍色，而細胞質則被染成淺紅色。
四、吉姆薩染色法注意事項：
1. 染液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，舊染液染色效果不佳。染液保存時間不宜超過48h；
2. 吉姆薩對pH極敏感，因此，緩沖液pH要準確，否則染色效果不佳。如用染色缸染色時，隨染色時間的延長，在染液表面常形成一層氧化膜（發(fā)亮）易附著在玻片上形成污穢，且不易除掉。因此在用染色缸染色，尤其用的不是現(xiàn)配者時，染色前應先用小片濾紙刮除液面的氧化層再進行染色。染色完畢，應把標本浸入水中漂洗染液。細胞
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責，環(huán)保在線對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風險，建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。
