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細(xì)胞生物學(xué)試劑

免疫組化染色前處理技術(shù)操作規(guī)范

時間:2017/4/18閱讀:297
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1.金標(biāo)檢測試劑盒取材:理想的取材厚度是0.2cm~0.3cm,大多數(shù)實驗室都認(rèn)為組織在加熱抗原修復(fù)過程中造成脫片的主要原因是取材過厚或脫水浸蠟處理不當(dāng)所致。良好的取材、固定、脫水過程是免疫組化質(zhì)控的前提,如果H&E切片都做不出滿意的染色結(jié)果,那么免疫組化染色也將無從談起,根本無法保證染色質(zhì)量。
2.固定:在眾多的組織固定液中(如甲醛、乙醇、戊二醛、多聚甲醛 等),金標(biāo)檢測試劑盒不同的實驗方法在使用上各有千秋。但在保持組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性、抗原可測定性、組織滲透性以及試劑的價格上,福爾馬林是、既經(jīng)濟(jì)又通用。而含酸或含汞的固定液對抗原保存均不理想。組織離體后固定一般不要超過30分鐘,在常溫條件下固定時間為8-24小時。同時還要注意避免福爾馬林過度固定造成的組織抗原丟失,有研究發(fā)現(xiàn)新鮮組織經(jīng)過福爾馬林一周固定后組織抗原丟失嚴(yán)重,抗原幾乎不能被檢測,因為組織固定后會引起蛋白或蛋白分子之間形成交聯(lián),導(dǎo)致抗原位點遮蓋,可以通過抗原修復(fù)方法來修正,若加抗體前不采用抗原修復(fù),則免疫組化染色常不能到達(dá)理想結(jié)果或不成功。組織同樣不能長時間放置在70%的乙醇中,酒精固定后的組織形態(tài)不如福爾馬林固定的組織。脫鈣液對抗原破壞較為嚴(yán)重,因此在組織脫鈣前在福爾馬林液中固定48小時,若組織沒有固定透則酸會破壞抗原,脫鈣液中酸的濃度與脫鈣時間都必須盡量控制在zui低的限度金標(biāo)檢測試劑盒

 

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