在臨床活檢工作中,對(duì)于各種腫瘤的正確判斷,歷來(lái)是外科病理學(xué)的核心問(wèn)題。因它關(guān)系到患者的治療和預(yù)后的問(wèn)題。在免疫組化技術(shù)沒(méi)開(kāi)展以前,主要靠HE,特殊染色和組織化學(xué)來(lái)進(jìn)行鑒別和診斷各種腫瘤,這些在當(dāng)時(shí)雖然解決了不少的問(wèn)題,但是對(duì)于較為復(fù)雜,較為多型性的腫瘤,就不能對(duì)其起源及所含的成分作出正確的判斷。隨著免疫組化工作的開(kāi)展,給許多以往有待于解釋原因的病理診斷上帶來(lái)了福音。許多以往無(wú)法解釋原因的病例,經(jīng)現(xiàn)今免疫組化染色技術(shù)的處理后,能夠?qū)ζ淦鹪矗嚓P(guān)的抗原或抗體成份給予顯示出來(lái),為腫瘤的診斷提斷了形態(tài)學(xué)的依據(jù)。雖然如此,對(duì)于一些較為復(fù)雜的抗原,就要根據(jù)具體情況作具體分析。
在生物界里面某些細(xì)胞僅具有一個(gè)抗原的決定簇,這是極少見(jiàn)的,而常見(jiàn)的是具有數(shù)百個(gè)乃至數(shù)千個(gè)的抗原決定簇。數(shù)量之多但又不是千篇一律,并非都在細(xì)胞的表面表達(dá)出來(lái),加上細(xì)胞的排列有高有矮,有長(zhǎng)有短,切片時(shí)有的被切到細(xì)胞膜,有的被攔腰斬?cái)啵虼嗽谝粡埱衅峡吹降耐环N抗原的表達(dá)也不一致,有的在細(xì)胞核,有的在細(xì)胞膜,也有的在細(xì)胞漿,這種現(xiàn)象是由于切片的原因所致。但是,抗原的表達(dá),在原來(lái)的表達(dá)上就有核、漿、膜之分。有的抗原可在一個(gè)部位表達(dá),有的抗原 則可在兩個(gè) 部位表達(dá) ,例如PCNA,它可以在細(xì)胞核表達(dá),也可在細(xì)胞漿表達(dá) 。有的抗原,可表現(xiàn)為雙向表達(dá),如上皮(樣)腫瘤間皮腫瘤和滑膜內(nèi)瘤等,用角蛋白標(biāo)記時(shí),可有陽(yáng)性表達(dá),用波形蛋白標(biāo)記時(shí),也可有陽(yáng)性表達(dá)。對(duì)于上述的許多現(xiàn)象,在觀察檢測(cè)時(shí),就要特別地小心,不斷地積累經(jīng)驗(yàn),以便于更好地鑒別各種抗原的所在部位。某些抗原不是在任何時(shí)候能表達(dá)出來(lái)的它們 需要一定的時(shí)間和條件。有人根據(jù)腫瘤細(xì)胞增生的能力將其分為三個(gè)階段:
1.進(jìn)入細(xì)胞周期的增殖細(xì)胞,這包括G1、G2及M期的細(xì)胞。
2.暫時(shí)未進(jìn)入細(xì)胞周期,但在某特定的時(shí)期和條件下,使其開(kāi)始增殖的細(xì)胞(G0期)。
3. 靜止的再進(jìn)入增殖周期的細(xì)胞,這些細(xì)胞己分化成熟,根據(jù)新陳代謝的規(guī)律,它們逐漸地進(jìn)行消之階段。
上述三個(gè)階段中,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系z(mì)ui為密切的是增殖細(xì)胞。因此,臨床檢測(cè)各種腫瘤抗原的表達(dá),應(yīng)根據(jù)上述 三個(gè)階段來(lái)加以區(qū)別,仔細(xì)加以分析,在作出診斷前,應(yīng)根據(jù)免疫組化的表達(dá),細(xì)胞的分化成度來(lái)加以區(qū)別,不要以為用了某種抗體抗原不表達(dá)就確定是不屬該抗體來(lái)源的腫瘤。有人在檢測(cè)淋巴瘤活性的研究中,發(fā)現(xiàn)PCNA在細(xì)胞周期的S期數(shù)量增高,G2期下降,核分裂期zui低,在 G1期又開(kāi)始增高。我們?cè)跈z測(cè)各種腫瘤的抗原時(shí)發(fā)現(xiàn),在同一病例中,增生的腫瘤細(xì)胞抗原表達(dá)強(qiáng),成熟的細(xì)胞表達(dá)與增生的細(xì)胞差不多,幼雅的細(xì)胞表達(dá)較弱,未分化的細(xì)胞呈陰性。基于上述的情況,我們應(yīng)充分認(rèn)識(shí)到,診斷各種腫瘤,免疫組化起到了重要的作用中,它可以為診斷提供可靠的準(zhǔn)確的形態(tài)學(xué)依據(jù),它為腫瘤的來(lái)源的定性,提供了理論及實(shí)物。但是,我們也應(yīng)該認(rèn)識(shí)到,任何事情都 不能有的準(zhǔn)確,免疫組化的檢測(cè)也一樣,有時(shí)也會(huì)受到未分化細(xì)胞的制約,因此,在作出診斷前,應(yīng)多做多方面的檢查,結(jié)合各方面的情況,作出正確的判斷。為了更好地應(yīng)用各種抗體來(lái)檢測(cè)相應(yīng)的抗原,下面我們將介紹常用抗體檢測(cè)范圍。
(一)、常用上皮組織及腫瘤標(biāo)記物
角蛋白(Keratin)
角蛋白分為表皮角蛋白和細(xì)胞角蛋白兩種,這是根據(jù)其分部的部位而分的。表皮角蛋白包括皮膚表皮,消化道粘膜上皮、腺上皮甲狀腺濾泡上皮、氣管、支氣管上皮、肺泡上皮,角膜上皮、前列腺上皮等。細(xì)胞角蛋白包括頜下腺,胰腺,胸腺,細(xì)胞,肝細(xì)胞,腎小管細(xì)胞等。目前,應(yīng)用上述細(xì)胞中間絲角蛋白作為抗原所制備的抗體有單克隆抗體和多克隆抗體。角蛋白可有19個(gè)亞型 ,分為堿性和酸性,從1-8為堿性,9-19為酸性,分子量40-68不等,復(fù)層鱗上皮多為高分子量,單層上皮則多為低分子量,了解這些在臨床的鑒別診斷及抗體的應(yīng)用中都 有極大的幫助。目前,檢測(cè)這類特質(zhì)的抗體很多,根據(jù)不同的克隆生產(chǎn)出不周類型的抗體。常用的抗體有:
①單克隆小鼠抗人細(xì)胞角蛋白(Monoclonal mouse anti human cytokeratin)克隆為MNF116。
該抗體應(yīng)用范圍,各類的冰凍切片,涂片,細(xì)胞培養(yǎng)片和經(jīng)甲醛固定石蠟包埋的組織切片 。用本抗體檢測(cè)的陽(yáng)性組織有:鱗狀上皮,甲狀腺濾泡上皮消化道上皮,胰腺膽管上皮,肝膽管上皮,角膜上皮等以及發(fā)生于上述來(lái)源的腫瘤。應(yīng)該注意的是有一些腫瘤在檢測(cè)時(shí),可出現(xiàn)兩種陽(yáng)性物,即用兩種抗體來(lái)檢測(cè)如采用CK和Vimentin,可出現(xiàn)雙向表達(dá)陽(yáng)性的腫瘤有:癌內(nèi)瘤,子宮內(nèi)膜腺癌肺腺癌,上皮樣內(nèi)瘤,滑膜內(nèi)瘤,唾液腺肌上皮瘤,間皮瘤等等。這是由于在這些腫瘤中存在著兩種不同的中間絲的緣故。
應(yīng)用該抗體檢測(cè)呈陰性的腫瘤有:各種淋巴瘤,各類肌源性的腫瘤,惡性黑色素瘤,骨腫瘤,纖維組織腫瘤,脂肪腫瘤,神經(jīng)組織腫瘤和精原細(xì)胞瘤等。
在檢測(cè)某些腫瘤時(shí),常可出現(xiàn)這樣的問(wèn)題,在同一張切片上,同樣的鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞,有的抗原表達(dá)為強(qiáng)陽(yáng)性,有的表達(dá)為中度陽(yáng)性性,有的表達(dá)為弱陽(yáng)性,甚至有的呈陰性。這主要是由于各種細(xì)胞處于增生的不同階段,細(xì)胞分泌的抗原量不同,因而表達(dá) 也不同。
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