人髓細(xì)胞觸發(fā)受體2(TREM2)ELISA試劑盒標(biāo)本的處理方法:
可用作 ELISA 測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。
1)血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。收集上清。如 有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成,應(yīng)再次離心。
3)尿液、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成, 應(yīng)再次離心。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的 成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)細(xì)胞:
檢測細(xì)胞的成份時,對于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后,細(xì)胞 就會被裂解。對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進(jìn)行后續(xù)操作。
6)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑,緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分)。仔細(xì)收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人髓細(xì)胞觸發(fā)受體2(TREM2)ELISA試劑盒深圳子科生物公司具有完善的ELISA試劑盒開發(fā)平臺,成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),如雙抗夾心法、(直接)競爭法、間接競爭法、阻斷法、間接法、雙抗原夾心法等方法,結(jié)合我公司的診斷試劑開發(fā)研究團(tuán)隊多年的研究經(jīng)驗(yàn),讓試劑盒質(zhì)量處于前列。
人髓細(xì)胞觸發(fā)受體2(TREM2)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
6. 溫育:操作同3。
7. 洗滌:操作同5。
8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
10. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人髓細(xì)胞觸發(fā)受體2(TREM2)ELISA試劑盒黃曲霉B1快速檢測試劑盒 96T/盒 0.1ppb
玉米赤霉烯酮快速檢測試劑盒 96T/盒 0.5ppb
黃曲霉總量快速檢測試劑盒 96T/盒 0.1ppb
伏馬毒素快速檢測試劑盒 96T/盒 1ppb
黃曲霉M1快速檢測試劑盒 96T/盒 0.05ppb
嘔吐毒素快速檢測試劑盒 96T/盒 3ppb
克倫特羅快速檢測卡 50T/盒 2、3ppb
萊克多巴胺快速檢測卡 50T/盒 2、3ppb
沙丁胺醇快速檢測卡 50T/盒 3、5ppb
克倫-萊克-沙丁-三聯(lián)檢測卡 40T/盒 3-3-5ppb
苯乙醇胺A快速檢測卡(產(chǎn)品) 50T/盒 3ppb
黃曲霉B1快速檢測卡 50T/盒 5ppb
玉米赤霉烯酮快速檢測卡 50T/盒 5ppb
嘔吐毒素快速檢測卡 50T/盒 20ppb
磺胺類快速檢測卡 50T/盒 20ppb
氯霉素檢測卡 50T/盒 0.1ppb